专题1 11 DNA重组技术的基本工具.pptVIP

理解教材新知; 1．基因工程突破了生殖隔离，实现了 不同种生物间的基因重组。 2．不同生物基因能拼接在一起的理论 基础是DNA分子都是由4种脱氧核 苷酸构成的规则的双螺旋结构。 3．外源DNA导入受体细胞表达的理论基础是密码子的通用 性。 4．限制性核酸内切酶的作用特点是识别双链DNA分子特定 的核苷酸序列，并在特定位点上切割。 5．限制酶和DNA连接酶的作用部位都是两个核苷酸间的磷 酸二酯键。 6．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍 生物、动植物病毒等。;[自读教材·夯基础] 1．基因工程的概念;②DNA双螺旋结构和 的确立； ③ 的破译。 (2)技术发明使基因工程的实施成为可能： ①基因转移载体和 相继发现； ② 技术的发明； ③DNA体外重组得到实现及 获得成功。 (3)基因工程的发展与完善： 1983年，世界第一例 培养成功，基因工程进入迅速发展阶段。1988年 的发明，使基因工程进一步发展和完善。; 1．通过分析基因工程的概念，讨论基因工程的原理是什么。 提示：基因重组。 2．将人的胰岛素基因导入大肠杆菌体内，通过大肠杆菌能大量生产人胰岛素。请分析人胰岛素基因能在大肠杆菌体内表达的理论基础是什么。 提示：生物共用一套遗传密码。;操作环境; 2．基因工程的原理和理论基础 (1)原理：基因重组。 (2)理论基础： ①拼接：不同生物DNA的基本组成单位相同，都是4种脱氧核苷酸；空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。 ②表达：生物界共用一套遗传密码，相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。;[自读教材·夯基础] 1．限制性核酸内切酶 (1)来源：主要从 生物中分离出来。; 2．DNA连接酶 (1)作用：将双链 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 。 (2)种类：;3．运载体 (1)作用：将 送入细胞中。 (2)种类： 、λ噬菌体衍生物和 等。; 1．结合DNA复制的过程，分析限制酶和DNA解旋酶的作用部位有何不同。 提示：限制酶作用于磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键，DNA解旋酶作用于两个碱基之间的氢键。 2．结合教材P5图1-3，分析黏性末端和平末端是如何形成的。 提示：限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条单链分割开，就形成黏性末端，而从识别序列的中心轴线切开就产生平末端。; 3．限制酶切割产生的黏性末端和平末端在恢复时需用什么酶？所用的该种酶是否可以不加选择？为什么？ 提示：DNA连接酶。不可以，E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端，而T4DNA连接酶既可以连接黏性末端又可以连接平末端。;; 2．限制性核酸内切酶与解旋酶的区别 (1)相同点：都是作用于DNA分子中的化学键。 (2)不同点：作用部位不同，前者作用于磷酸二酯键，后者作用于氢键。 3．DNA连接酶与DNA聚合酶的比较;比较项目; 4．上述四种酶的作用部位图解 ( 1)作用于a(磷酸二酯键)的酶有：限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶。 (2)作用于b(氢键)的酶是解旋酶。 ; [特别提醒] (1)不同DN