高中生物选修三复习课件.pptxVIP

【一、基因工程】一、DNA重组所需的三种工具：1、限制性内切酶——“手术刀”作用：切割磷酸二酯键①EcoRⅠ→产生粘性末端②SmaⅠ→产生平末端2、DNA连接酶——“分子缝合针”作用：链接磷酸二酯键①E˙coliDNA连接酶→连接粘性末端②T4DNA连接酶→连接平末端或粘性末端3、载体——“分子运输车”条件：①有一个或者多个限制酶切割位点②能自我复制③有特殊的标记基因（常用质粒作为载体）二、基因工程的基本操作程序目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定1、目的基因的获取（1）从基因文库获取（2）利用PCR技术扩增目的基因（3）人工合成比较项目DNA复制PCR技术区别解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐热的DNA聚合酶温度细胞内温和条件控制温度，需90℃～95℃高温结果合成DNA分子合成DNA片段或基因联系(1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板(2)原料：均为四种脱氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸PCR技术与DNA复制的比较质粒DNA分子限制酶处理一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）——核心同一种2、基因表达载体的构建①过程：:②组成：必须有启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。方法导入植物细胞导入动物细胞导入微生物细胞农杆菌转化法基因枪法（单子叶）花粉管通道法——显微注射法——感受态细胞吸收DNA分子（Ca2+法）3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定——检查是否成功检测—鉴定—①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因②检测目的基因是否转录出了mRNA③检测目的基因是否翻译成蛋白质个体生物学水平的鉴定，如抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等方法——方法——方法——DNA分子杂交分子杂交抗原-抗体杂交三、基因工程的应用（1）植物方面1、抗虫转基因植物2、抗病转基因植物3、抗逆转基因植物4、改良植物品质（2）动物方面1、提高动物生长速度2、改善畜产品的品质3、用转基因动物生产药物4、用转基因动物作器官移植的供体（3）基因治疗：将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。（只是改变体细胞的基因，生殖细胞未改变，后代可能还会患病。）1、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（）个A.540B.8100C.17280D.75602、在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是(　　)。A．通过观察害虫吃棉叶是否死亡B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带C．检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D．检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带3、哪项不是基因表达载体的组成部分()A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因4、(2008,全国高考)已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种数是（）A．3B．4 C.9D．12【二、蛋白质工程】1、蛋白质工程的实质：定向改造或生产人类所需的蛋白质。2、结果：可以生产自然界没有的蛋白质3、操作对象：基因结构4、过程：先反中心法则，后顺中心法则。预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）【三、细胞工程】一、植物细胞工程（一）植物的组织培养1、细胞全能性：已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。原因：生物的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质。2、全能性大小：受精卵＞生殖细胞＞体细胞植物细胞动物细胞分化程度低分化程度高细胞分裂能力强细胞分裂能力弱幼嫩的细胞衰老的细胞3、植物组织培养（1）培养基：①水②无机盐③有机小分子：糖、氨基酸等④激素：生长素，细胞分裂素⑤琼脂：起支持作用还需提供适宜的条件（如无菌环境和适宜温度）（2）过程：离体细胞、组织、器官脱分化（无光）再分化（有光）愈伤组织胚状体或丛芽试管苗愈伤组织特点：细胞排列疏松、高度液泡化、细胞壁薄、呈无定形状态注意：取材须取形成层，生长素和细胞分裂素的比例。（二）植物体细胞杂交意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种应用：（1）微型繁殖（2）作物脱毒（