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血清甘油三酯（TG）测定 1.2 原理：用高效的微生物脂蛋白脂肪酶（LPL）使血清中TG水解成甘油与脂肪酸，将生成的甘油用甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P），然后以过氧化物酶（POD）、4-氨基比林（4-AAP）与4-氯酚（三者合称PAP）显色，测定所生成的H2O2，故本法简称为GPO-PAP法，反应式如下： TG + 3H2O 脂肪酶 甘油 + 3 RCOOH（脂肪酸） 甘油 + ATP 甘油激酶 甘油-3-磷酸（G-3-P） + ADP G-3-P + O2 GPO 磷酸二羟丙酮（DAP） + H2O2 2H2O2 + 4-AAP + 4-氯酚 过氧化物酶 苯醌亚胺非那腙 + 4H2O + HCl 1.3标本的采集 1.3.1受检者的准备： 除胆固醇（TC）测定不一定用空腹血外，测定甘油三酯（TG）、脂蛋白与载脂蛋白（apo）时应在禁食（可少量饮水）12小时后抽血。24小时内不饮酒，以免影响TG水平。对于体检对象抽血前应有2周左右时间保持平常的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳吼个月查血才能反映基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β-受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，在查血以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用有关药物的情况。对体检对象及作前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检查。 1.3.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取座位。体位影响水分在血管内的外的分布，因此影响血脂水平。例如站立5分钟可使血脂浓度提高5%，15分钟可提高16%，故在抽血前至少应静坐5分钟。 一般用肘静脉取血，也可以用其他臂静脉。止血带的使用不可超过1分钟，穿刺成功后应立即松开止血带，然后抽血。静脉阻滞5分钟可TC增高10%～15%。 1.3.3抗凝剂：血清和血浆均可用于TG测定，但后者结果比前者约低3%。我国多用血清标本，如用血浆测定应乘以校准系数1.03，或在报告单上注明。如用血浆，多主张用EDTA-Na2抗凝（1mg/ml）。EDTA抗凝血浆中的TC和TG水平比血清中约低3%，EDTA浓度越高血浆中偏低越明显。但肝素抗凝不影响血浆中水平。 1.3.4标本处理：血标本应尽快送往化验室，室温放置30～40分钟后离心，放置时间不得超过3小时。血清必须吸出，转移至有盖小试管中（或用封口膜防止水分挥发），如不能当天测定，可暂存4℃冰箱中，至少可稳定4天。如需长期保存，用作TC测定者-20℃已足够，用作TG、脂蛋白、apo测定者最好保存在-70℃，不要反复冰冻与融化。 1.3.5标本稳定性：血清。2～8℃稳定3天，-20℃稳定数周，避免反复冻融。 1.3.6标本容器：普通真空采血管 1.4 试剂 1.4.1 试剂均购自北京九强生物技术有限公司 1.4.2试剂组成与浓度： 试剂成分 浓度 Good`缓冲液，pH7.2 4氯-苯酚 Mg2+ ATP 甘油三酯激酶 过氧化物酶 脂蛋白酯酶 4-氨基-安替吡啉 甘油-3-磷酸氧化酶 50mmol/L 4mmol/L 15mmol/L 2mmol/L ≥0.4KU/L ≥2KU/L ≥2KU/L 0.5mmol/l ≥0.5KU/L 1.4.3试剂稳定性 1.4.3.1试剂在2-8℃密封避光保存可稳定至有效期，有效期为12个月。 1.4.3.2已经开启的试剂应注意避免污染，试剂在试剂仓中稳定28天。 1.4.3.3试剂如出现浑浊、沉淀、变色等情况时，试剂可能变质。 1.4.3.4本试验是Trinder反应，试剂空白吸光度大于0.2禁用。 1.4.4线性：本法线性范围可达到0.3～11.4mmol/L。如超过线性范围，请以0.9%的生理盐水稀释重做，结果乘以稀释倍数。 1.4.5 质控： 1.4.5.1质控频率：每天一次。 1.4.5.2质控血清：省临床检验中心提供。 1.4.5.3如果结果偏离范围，请按以下步骤查找原因： 1.检查参数设置和光源是否正确。 2.检查比色杯和吸样针是否洁净。 3.检查水是否被污染，细菌增长会导致不正确的结果。 4.检查反应温度。 5.检查试剂盒的效期。 6.其他有可能影响结果的系统或随即因素。 1.4.6 检验方法的局限性和抗干扰性： 抗坏血酸≤10mg/dl、总胆红素≤25mg/dl、HB≤200mg/dl时不会对该试验产生干扰。 1.4.7 准确性：准确性偏差不超过±10