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细胞问答
5. 举例说明细胞的形态与功能相适应。(答案) 答:细胞的形态结构与功能的相关性与一致性是很多细胞的共同特点。如红细胞呈扁圆形的结构,有利于O2和CO2的交换;高等动物的卵细胞和精细胞不仅在形态、而且在大小方面都是截然不同的,这种不同与它们各自的功能相适应。卵细胞之所以既大又圆,是因为卵细胞受精之后, 要为受精卵提供早期发育所需的信息和相应的物质, 这样, 卵细胞除了带有一套完整的基因组外,还有很多预先合成的mRNA和蛋白质, 所以体积就大; 而圆形的表面是便于与精细胞结合。精细胞的形态是既细又长, 这也是与它的功能相适应的。精细胞对后代的责任仅是提供一套基因组,所以它显得很轻装; 至于精细胞的细尾巴则是为了运动寻靶,尖尖的头部,是为了更容易将它携带的遗传物质注入卵细胞。9. 蔗糖、甘油和氯化铯都是密度离心分离中的介质, 它们在性质上和使用上有什么不同?(答案) 答:CsCl可自行形成密度梯度,所以不必特别制备密度梯度,只要将待分离的样品与之混匀即可。在离心的过程中,具有不同密度的颗粒随CsCl密度梯度的形成重新分配;而蔗糖和甘油要人工置备密度梯度。 蔗糖和甘油的最大密度为1.3g/cm3 ,所以只能用于分离密度在 1.3g/cm3以下的细胞器或细胞结构;而氯化铯的最大密度可达1.9g/cm3以上, 可用于分离密度大于1.3g/cm3的DNA分子。 在原理上, 由于具有不同密度的颗粒随CsCl密度梯度的形成重新分配,所以又称为浮力密度离心(buoyant density centrifugation); 而蔗糖和甘油则是在被离心的物质在下降的过程中由于密度的不同而被阻止在不同的部位,故是重力密度离心。 6. 请简述红细胞膜骨架的装配过程(答案) 答:分为三步; ① 首先是血影蛋白与4.1蛋白、肌动蛋白的相互作用:血影蛋白的α和β亚基形成二聚体,在红细胞膜内,血影蛋白多以4聚体形式存在(也有6聚体、8聚体)。血影蛋白4聚体在4.1蛋白的帮助下同肌动蛋白寡聚体结合组成骨架的基本网络。一般认为,12~17个肌动蛋白寡聚体及4.9蛋白和原肌球蛋白组成一个基本结构蛋白,这种结构蛋白再结合到血影蛋白和4.1蛋白复合体上。4.9蛋白和原肌球蛋白可稳定肌动蛋白寡聚体。 ② 4.1蛋白同血型糖蛋白相互作用:4.1蛋白的N端,35000的区域在生理状态下带正电荷,而血型糖蛋白带负电荷,所以4.1蛋白能够以静电稳定性同血型糖蛋白结合。 ③ 锚定蛋白与血影蛋白、带3蛋白的相互作用:锚定蛋白N端90000区可与带3蛋白结合,而72000区可与血影蛋白结合,由于带3蛋白是膜整合蛋白、血影蛋白是膜骨架蛋白,所以锚定蛋白起媒介作用将骨架蛋白与质膜相连。 11. 孔蛋白只存在于双层膜的外膜中,为什么?(答案) 答:由于孔蛋白的孔径大,所以只能存在于外膜,而不能存在于内膜。内膜有界膜的作用,如果有孔蛋白,则失去界膜的功能。 12. 在酶法标记测定膜蛋白的定向实验中若是要标记膜内侧的蛋白,该如何处理?(答案) 答:将人工脂质体放入低渗溶液中,这样, 乳过氧化物酶就能进入脂质体进行内侧蛋白质标记(Q3-1)。 图Q3-1 乳过氧化物酶就能进入脂质体进行内侧蛋白质标记 13. 请说明磷脂酶处理法研究红细胞膜脂在脂双层中定位的原理(答案) 答:由于红细胞具有血影现象,只要将红细胞置于低离子浓度的溶液中,红细胞就会发生渗漏释放出内含物,得到只有红细胞膜的空壳。然后调整溶液中的Mg2+离子浓度,改变红细胞小泡的状态。若是从溶液中除去Mg2+, 则形成外翻的小泡,若是加入Mg2+则是正常方向的小泡, 然后用脂酶分别处理这两种红细胞膜。常用的脂酶是磷脂酶(phospholipase),这种酶也是因为相对分子质量大而不通过细胞膜,所以磷脂酶只能附着在膜泡的外表面,能够被磷脂酶水解的就是位于外表面的磷脂,然后再根据它原来的状态,确定在红细胞膜脂中的定向。 21. 简述Ca2+ 泵(Ca2+ pump, Ca2+ ATPase)的结构和作用机理(答案) 答:Ca2+-ATPase有10个跨膜结构域,在细胞膜内侧有两个大的细胞质环状结构,第一个环位于跨膜结构域2和3之间,第二个环位于跨膜结构域4和5之间。在第一个环上有Ca2+离子结合位点;在第二个环上有激活位点,包括ATP的结合位点。Ca2+-ATPase的氨基端和羧基端都在细胞膜的内侧,羧基端含有抑制区域。在静息状态,羧基端的抑制区域同环2的激活位点结合,使泵失去功能,这就是自我抑制。 Ca2+-ATPase泵有两种激活机制,一种是受激活的Ca2+/钙调蛋白(CaM)复合物的激活,另一种是被蛋白激酶C激活。当细胞内Ca2+浓度升高时,Ca2+同钙调蛋白结合,形成激活的Ca2+/钙调蛋白复合物,该复合物同抑制区结合,释
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