cdc20论文：cdc20结肠癌基因不稳定.docVIP

cdc20论文：Cdc20基因突变与小鼠结肠癌的发展 【中文摘要】探索cdc20基因突变对结肠癌发展的影响,并初步阐明其分子机制。方法：应用同源重组技术进行载体打靶,构建了cdc20条件性敲除及点突变相结合的载体,并将构建好的载体,经囊胚注射构建cdc20loxp/+基因敲除小鼠。将cdc20loxp/+基因突变小鼠与APCmin/+基因突变小鼠交配,运用PCR进行基因鉴定,得到cdc20loxp/+; APCmin/+基因型小鼠作为实验组,余基因型小鼠作为对照组。通过表型分析及组织学分析,比较实验组及对照组的差异并探求其分子机制。制作cdc20loxp/+; APCmin/+基因型、cdc20loxp/+基因型、APCmin/+基因型和WT基因型的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs),绘制生长曲线比较各种基因型MEFs生长情况。各种基因型MEFs细胞滴片计数染色体个数,并检测有丝分裂姐妹染色单体分离情况及是否存在非整倍体(aneuploid)。构建PMXs-E1A-RAS病毒载体,将其转染入各种基因型MEFs细胞,进行克隆形成实验,阐明cdc20基因是否具有加快细胞转化的能力。通过上述体外细胞实验进一步证实并揭示cdc20对结肠癌发展的影响及其分子机制。结... 【英文摘要】Objects:Demonstrate the relationship between cdc20 mutation and the promotion of colon cancer, furthermore indicate the molecular mechanism.Methods:Apply homologous recombination technology and blastocyst injection, to generate mice carrying cdc20 a null allele caused by the presence of the loxp cassette. Genotyping the mice by PCR,to yield experimental and control mice. Compare the experimental and control mice by phenotypic analysis and histology analysis, to discover the differences and the molecular... 【关键词】cdc20 结肠癌 基因不稳定 【英文关键词】cdc20 colon cancer chromosome instability 【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 【目录】Cdc20基因突变与小鼠结肠癌的发展 摘要 4-5 Abstract 5-6 目录 7-8 1 前言 8-14 2 材料和方法 14-28 2.1 实验材料 14-17 2.2 实验方法 17-28 3 实验结果 28-35 3.1 动物实验结果 28-31 3.2 MEFs细胞实验结果 31-35 4 讨论 35-37 5 结论 37-38 参考文献 38-44 附录 44-46 英文缩略词表 46-47 攻读学位期间发表的文章 47-48 致谢 48