2015年分子生物学---生技概述.pptx

分子生物学 Molecular Biology 生命科学与农学学院 王雪芹 Email: wangxueqin0218@163.com Tel:参考教材;考核方式;课程安排;课程安排;绪 论;第一节 分子生物学的含义 ;第二节 分子生物学简史;1.理论上的三大发现 ;英国科学家格里菲思 1879—1941;1928年，细菌学家Griffith;;细菌转化实验;;噬菌体转染实验 ;噬菌体转染实验 ; ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ; ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ;1.2 DNA双螺旋模型 1953 Watson/Crick 提出了DNA双螺旋结构模型； 意义：对生命科学的发展作用可与达尔文学说媲美，与孟德尔定律齐名。从而使遗传学的研究全面进入分子遗传学阶段． ; 沃森、克里克研究小组;DNA双螺旋结构模型的意义;1.3 确定了遗传信息的传递方式 1961 年 Monod 和 Jacob 提出了操纵子学说； 1964 年 Nirenberg 等提出了“三联体密码说”； Crick 提出了遗传信息流向和表达的中心法则 这三大发现大大促进了生命科学的迅速发展，为基因工程的诞生奠定了重要的理论基础． 　　　;Gene Expression;中心法则(central dogma)阐述了生物世代、个体以及从遗传物质到性状的遗传信息流向，即遗传信息在遗传物质复制、性状表现过程中的信息流向 最初由Crick提出，并经过了多次修正;2.技术上的三大发现 ;;;当一个DNA分子含有6个拷贝的 GAATTC，它将被酶切成7个片段，可用凝胶电泳方法将其分离。;采用几种限制性内切酶组合可以使DNA分子产生特定的片段. e.g. EcoRI + HindIII;DNA连接酶(DNA ligase );DNA连接酶的类型;DNA连接酶 VS DNA聚合酶;2.2 基因运载工具—基因进入受体细胞的载体 载体(Vector):将外源DNA或基因携带进入宿主细胞进行扩增或表达的工具。 载体必须具备的条件： 能够在宿主细胞中复制并且稳定地保存。 具有一至多个限制性酶切位点，以便与外源基因连接。 具有某些标记基因，便于进行筛选。 对受体细胞无害。;载体按功能可以分为两类 1. 克隆载体(cloning vector)：主要是对目的基因克隆，建立DNA文库和cDNA文库，其上有复制子即可。 2. 表达载体(expression vector) ：能使目的基因在宿主细胞中表达的一类载体，需要有复制子及强启动子。;按工作方式 质粒载体 噬菌体载体、 粘粒载体、 人工染色体载体 按受体细胞 原核细胞载体 真核细胞载体;大小为4361bp 带有一个复制起始位点，保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的功能。 具有两种抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，;2.3 逆转录酶的发现 ;逆转录酶应用： 1 反转录酶常用来应用在聚合酶链反应这种研究方式中，以RNA为主的技术称作反转录聚合酶链反应（RT-PCR）。典型的PCR技术只能用来用在DNA上，但是有着反转录酶的帮助下，RNA亦可以被反转录成DNA，因此使PCR可以分析RNA分子。 2 抗病毒药物：逆转录酶抑制剂 ;第三节 分子生物学研??内容;分子生物学的研究内容 ;1. DNA重组技术（又称基因工程）;;重组DNA技术操作过程可形象归纳为 ;;DNA重组技术应用前景 ;2.基因表达调控研究;3. 生物大分子的结构功能研究 ——结构分子生物学;4. 基因组、功能基因组与生物信息学研究;结构基因组学;二、后基因组学的研究;功能基因组学;思考题