生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定.ppt

(2)盐酸可改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA 与染色剂结合。 2．实验流程 冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s 3．实验现象及相关结论 本实验的注意事项 (1)几种液体在实验中的作用 ①0.9%的NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 ②8%的盐酸： a.改变细胞膜的通透性 b．使染色体中DNA与蛋白质分离 ③蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片 * 生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定 1.实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 （1）还原糖+斐林试剂 砖红色沉淀 （现用现配） 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖（蔗糖、淀粉等是非还原糖） （2）脂肪+ 水浴加热 苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 镜检 镜检 橘黄色 红色 双缩脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）是两个分子脲（即尿素）经180℃左右加热，放出一个分子氨（NH3）后得到的产物。 （3）蛋白质+双缩脲试剂 紫色 双缩脲反应即在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲能与铜离子（Cu2+）作用，形成紫红色络合物。 双缩脲试剂用于通过双缩脲反应检测双缩脲，因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。 （4）淀粉+碘液 蓝色 2.实验步骤： （1）还原糖的鉴定 1 1 1 （2）脂肪的鉴定 取材：花生种子浸泡3～4 h，将子叶削成薄片 制片 镜检：在低倍镜下找到已着色的花生子叶最薄处 然后用高倍镜观察 结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染成红色 ①取最理想的薄片 ②染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染色3 min或苏丹Ⅳ1min ③去浮色： 1～2滴50%的酒精 ④制成临时装片：吸、滴、盖 （3）蛋白质的鉴定 1 1 3.实验注意问题 （1）实验材料的选择 在物质的鉴定实验中,选择无色或颜色较浅的材，以避免材料本身颜色的干扰。 （2）物质鉴定的实验一般不设立对照组（自身前后对照），若设立，对照组应加入成分已知的物质（标准对照）。 辨析比较 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是0.1g/mL 相同点 B液CuSO4浓度为0.01 g/mL相同点 乙液CuSO4浓度为0.05g/mL 浓度 紫色 砖红色 颜色 具有肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O 反应 原理 不需加热即可反应 需水浴加热 呈色反应条件 使用时先加A液再加B液 甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用 使用 方法 不同点 双缩脲试剂 斐林试剂 比较 项目 实验：观察DNA和RNA在细胞中的分布 RNA广泛分布于细胞质中 绿色周围的红色范围较广 DNA主要分布于细胞核中 绿色明显集中且接近细胞中央 结论 现象 实验结果示例 材料选择 1.生物实验选材基本要求: ①符合实验要求②易获取的原则③不对实验结果产生干扰 2.本实验选材初步分析： 真核细胞 （如：洋葱鳞片叶表皮细胞，人的口腔上皮细胞等。 该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。） (2)关于甲基绿和吡罗红溶液的配制：甲基绿吡罗红染色液包括A液和B液，使用时现用现配。 * * *