02药物的鉴别实验分析.ppt

4.气体生成反应鉴别法（1）胺类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物：经强碱处理后，加热，产生氨气；（2）含硫的药物：可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体；（3）含碘有机药物：经直火加热，可生成紫色碘蒸气；（4）含醋酸酯和乙酰胺类药物：经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。 （二）光谱鉴别法 1.紫外光谱鉴别法 有机药物分子中含有共轭结构，生、助色基团而显示特征吸收光谱，可作为鉴别的依据。 光谱简单，专属性差。 常用的方法有： （1）测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长； （2）规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收度； （3）规定吸收波长的吸收系数法； （4）规定吸收波长的吸收度比值法； （5）经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。 以上方法可以单个应用，也可几个结合起来使用，以提高方法的专属性。 2.红外光谱法专属性强、应用较广（固体、液体、气体样品）。主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于结构复杂、细微差别同类药物，如磺胺类、甾体激素类和抗生素类药品。鉴别方法：中国药典和BP(2000）均采用标准图谱对照法。中国药典收载的光谱图，系用分辨率为2cm-1条件绘制，基线一般控制在90%透光率以上，供试品取样量一般控制在使其最强吸收峰在10％透光率以下。 （1）试样制备方法 压片法、糊法、膜法、溶液法（2）应用光谱图对照时应注意的问题： 1）由于晶型的影响，致使录制的光谱图与光谱集所收载的光谱图不一致，应按光谱集中各相应光谱图中备注的方法进行预处理后，再行录制。 分别按同晶型对照的图谱比较同质异晶现象的药品。 2）采用压片法时，若样品（包括盐酸盐）与溴化钾之间不发生离子交换反应，则采用溴化钾作为制片基质。否则，盐酸盐样品制片时必须使用氯化钾基质。3）测定时应注意二氧化碳和水汽等的大气干扰，必要时，应采取适当措施（如采用干燥氮气吹扫，真空）加以改善。 4）仪器间分辨率的差异及不同的操作条件（如狭缝程序，扫描速度等）可能影响药品光谱图的判断。 需用在比较样品的光谱图前，首先比较聚苯乙烯薄膜的光谱图。5）本法对于多组分药物或存在多晶现象而又无可重复转晶方法的药物不适用。 （三）色谱鉴别法 利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（Rf，值或保留时间）进行鉴别试验。采用与对照品（或经确证的已知药品）在相同的条件下进行色谱分离，并进行比较鉴别。常用的方法有： 1.薄层色谱法 一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品与对照品主斑点的颜色与位置应一致。2.高效液相色谱和气相色谱法 一般规定按供试品含量测定项下的色谱条件进行试验。要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致。 内标法时，要求药物与内标物峰的保留时间比值也应相同。 （四）药物鉴别方法新动向 1.仪器分析应用数量增加，尤其是红外光谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。 2.制剂广泛采用IR法鉴别。与原料药相比，制剂需先分离再压片绘制图谱。 四、鉴别实验条件 鉴别试验必须在规定条件下完成，否则将会影响结果的判断。影响鉴别反应的因素主要有被测物浓度，试剂的用量，溶液的温度、 pH ，反应时间和干扰物质的存在等。 五、鉴别试验的灵敏度（一）反应灵敏度和空白试验 在一定条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为反应的灵敏度（sensitivity）。它以两个相互有关的量来表示： 最低检出量（又称检出限量） （minimum detectable quantity)  最低检出浓度（又称界限浓度） （minimum detectable concentration) 最低检出量（以m表示），就是应用某一反应，在一定的条件下，能够观测出试验结果的供试品的最小量，其单位通常用微克（μg）表示。 最低检出浓度是应用某一反应，在一定条件下，能够观测出供试品的最低浓度，通常以1: V(或1:G）表示，其中V(或G)表示含有1g重某供试品的溶液的毫升（或克）数。 最低检出量和最低检出浓度之间的关系可以用下式表示： 式中υ为鉴别试验时，所取供试品溶液的最小体积（ml）。 影响条件：1.在选用灵敏度很高的反应时，必须采用高纯度的试剂，非常洁净的器皿，才能保证鉴别试验结果的可靠性。2.为了消除试剂和器皿可能带来的影响，应同时进行空白试验（blank test)以供对照。 空白试验，是在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。3.与分析方法、观