基因工程及其应用 课件 - 副本.pptVIP

3.基因工程技术中的目的基因主要来源于 ( ) A.自然界现存在生物体内的基因B.自然突变产生的新基因C.人工诱变产生的新基因D.科学家在实验室中人工合成的基因 A 4.下列关于基因工程的叙述中,正确的是( ) A.限制酶只用于提取目的基因B.细菌体内的环状DNA均可作运载体C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成. 5.以下说法正确的是( ) A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.只要受体细胞中含有目的基因，目的基因就一定能够成功表达 C B 第6章 从杂交育种到基因工程第2节 基因工程及其应用 人教版必修2 基因是有遗传效应的DNA片段，是生物体遗传的功能单位和结构单位. 基因的定义？ 并不是随便一段DNA就称为基因。基因 是一段DNA，但是一段DNA不一定是基因 --ATGCATGCATCCATGCTAGCCATCCCTAAGGACAG--- --TACGTACGTAGGTACGATCGGTAGGGATTCCTGTC--- 基因 基因 非基因片段 基因是特定的DNA片段，可剪切、可拼接到其他生物的DNA上去，有遗传效应,可独立起作用。 1、生物的遗传物质主要是DNA。 2、所有生物共用一套密码子。 胰岛素： 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4~5g胰岛素 1979年，利用转入人胰岛素基因的大肠杆菌， 2000L培养液提取100g ， 相当于2吨猪胰腺中提取的量 。 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。 ? 基因工程(gene engineering) 1.原理： 2.操作水平： 3.结果： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 ? 基因工程(gene engineering) 基因工程育种 基因工程的基本步骤 （一） 提取目的基因 （二）目的基因与运载体结合 （三）将目的基因导入受体细胞 （四）目的基因的检测和表达 （一）基因的“剪刀” —限制性核酸内切酶（限制酶） 基因工程的工具 1、基因工程的 “ ” G A A T T C C T T A A G C T T A A G A A T T C G 粘性末端 限制性内切酶 EcoRⅠ T G C A A C G T A C G T G C A T 另一种限制酶 （一）基因的“剪刀” １、分布： 主要在微生物中 专一性 3’,5’-磷酸二酯键（而非氢键） 产生黏性末端 —限制性核酸内切酶（限制酶） 基因工程的工具 ４、结果： 3、切割具体部位： ２、作用特点： 4000多种（识别序列和切割点不同） 5、种类： 1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口？ 思考与讨论: 目的基因 目的基因 黏性末端 黏性末端 G C T A T A G C T A T A 请比较粘性末端序列 2、会产生几个黏性末端？ 思考与讨论: 目的基因 （二）基因的针线——DNA连接酶 G C T A T A G C T A T A 　　作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 连接的是什么部位? 3’,5’-磷酸二酯键 （而非氢键） C T T A A G A A T T C G DNA连接酶 A A T T C G DNA复制 DNA聚合酶 DNA聚合酶和DNA连接酶的比较 不同点 相同点 DNA聚合酶 DNA连接酶 连接DNA片段 不需要模板 连接DNA单链片段与游离的脱氧核苷酸 需要模板 连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键 （三）基因的运输工具——运载体 1、功能： 2、常用的运载体： 3、必须具备的条件： 将目的基因送入受体细胞 质粒、噬菌体、动植物病毒 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. （三）基因的运输工具——运载体 1、功能： 2、常用的运载体： 3、必须具备的条件： 将目的基因送入受体细胞 质粒、噬菌体、动植物病毒 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3.对宿主细胞无毒害作用。 4.具有某些标记基因，便于进行筛选。 1、常用的受体细胞： 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、植物细胞、动物的受精卵 2、常用微生物作受体细胞