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第六章 水产动物疾病诊断 在工业化、集约化养殖过程中,不管如何注意管理、谨慎饲养,养殖动物的疾病的发生是不可避免的。无论是何种疾病,只有正确诊断才能对症下药。因此,能否正确诊断疾病,是防治工作中的一个关键问题。疾病的诊断有二个步骤: 一、机体检查;二、现场调查。 第一节 发病机体的检查 一、检查鱼病的注意事项 1、检查对象应是半死不活或刚死去的病变标本; 2、检查时始终要保持机体体表、组织、器官的湿润; 3、解剖机体,分离各器官要保持完整、清洁; 4、检查按顺序进行,做好记录,防止遗漏; 5、所用工具要充分洗干净; 6、检查对象要有一定的数量,一般3-5个。 二、鱼发病的共同特征 1、活动情况失常; 2、身体的形态和外表颜色发生一定的变化; 3、吃食能力下降或不吃食。 三、肉眼检查(目检) 鱼体的肉眼检查,简称目检。在实际生产中,目检是检查鱼病的主要方法之一。目检可以观察到病原体侵袭机体后机体表现出的各种症状,对于某些症状表现明显的疾病,有经验的技术人员凭借经验即可作出初步诊断。 由于目检主要是以症状为依据,但一病多症,多病一症现象较多。因此,在目检的时候应该做到认真检查,全面分析,并做好记录。 目检的检查顺序和方法 1.体表 将病鱼置于白搪瓷盘中,按顺序从嘴、头部、鳃部、体表、鳍条仔细观察。 2.鳃 检查鳃部,重点是鳃丝。先看鳃盖是否张开,然后用剪刀小心把鳃盖剪掉,观察鳃片上鳃丝是否肿大或腐烂,鳃的颜色是否正常,粘液是否增多等 目检的检查顺序和方法 3.内脏 检查内脏时,应先把一边的腹壁剪掉,剪腹壁时注意不损伤内脏。先观察是否有腹水或肉眼可见的较大型的寄生虫。其次是观察内脏的外表,如肝脏的颜色、胆囊是否肿大以及肠道是否正常,然后将靠近咽喉部位的前肠和靠近肛门部位的后肠剪断,取出内脏后,把肝、肠、鳔、胆等分开,再把肠分为前肠、中肠、后肠三段,轻轻去掉肠道中的食物和粪便,然后进行观察。 四、镜 检 用显微镜、解剖镜、放大镜对鱼病进行检查,简称镜检。镜检是在鱼病情况比较复杂,仅凭肉眼检查不能作出正确诊断而作的更进一步的检查工作。在一般情况下,鱼病往往错综复杂,很多病原体又小,除一些较明显、情况又较简单,凭目检可以作出有把握的诊断外,一般都有必要进行镜检。 检查的顺序和方法 镜检顺序: 体表 鳃 肠道 眼睛 脑 血液 其它 (1)载玻片法 适用于低倍镜或高倍显微镜检查。方法是取下一小块病灶组织或一小滴内含物,放在干净的载玻片上,滴入一小滴清水或生理盐水,盖上盖玻片,轻轻地压平,先在低倍显微镜下检查,分辨不清或可疑的可再用高倍镜检查。 (2)玻片压缩法 用两片厚度约为3~4毫米,大小约6 x12厘米的玻片,先将要检查的组织或者是器官的一部分以及粘液等,放在其中一片玻片上,滴上适量的清水或盐水(注意体表部分或粘液用普通水,体内器官或组织用0.65%的盐水),用另一片玻片将其压成透明的薄层,即可放到解剖镜或低倍显微镜下检查。? (3) 水浸片的制作 1、取干净的载玻片,用清洁的镊子取病变部位的一小块组织放在载玻片上; 2、用干净吸管吸取少量蒸馏水或生理盐水(1/2滴到1滴); 3、小心盖上盖玻片,不能有小气泡; 4、显微镜观察。 (4)血涂片的制作 1、取血:用无菌或洁净的注射器在鱼鳃、心脏、尾静脉抽血取少量的血。 2、涂片:在洁净的盖玻片上作“之”字形涂抹,不能太厚,倒放浸入固定液,再作进一步的处理;或直接滴入载玻片的1/4处,再用同样大小的载玻片推片,推到玻片的3/4处,盖上盖玻片观察或晾干,染色。 (5)体表检查 (6)鳃丝检查 (5)肠道检查 分前、中、后三段检查; 五、病原体的计数标准 中科院水生生物研究所作出规定: 1.用“﹢”“﹣”表示病原的多少; 2.在一般情况下,打上“﹢﹢”的就开始出现少量死亡; 3.细菌、水霉、原生动物、吸虫、线虫、棘头虫、蛭类、甲壳动物、软体动物的计数标准。 一些常见的计数标准方法 第二节 现场调查 一、了解发病养殖动物在池中的各种现象 二、了解饲养管理情况 三、了解水质变化情况 四、了解池塘周边环境情况 五、了解发病池的发病史、治疗史 第三节 病原体的收集、固定和保存 一、标本的收集方法 1、病毒标本的收集;2、细菌标本的收集、3、真菌标本的收集;4、原生动物标本的收集。 二、标本的固定和保存方法(水霉、鳃霉、鞭毛虫、锥体虫、纤毛虫、孢子虫、吸虫、绦虫、棘头虫、线虫、蛭类、甲壳类) 三、寄生虫的染色法 四、常用固定剂和染色试剂的制备法 第三节 细菌和病毒的鉴定技术 过氧化酶 氧化酶试验 氧化和发酵试验 溶血试验 各类抑制试验 氨基酸脱羧酶试验 生化鉴定管试验 用API试剂盒鉴定 其他试验 感染试验 合胞体观察 包涵体观察 血
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