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编号：研究中心, 共页 承担单位：福建省农科院研究所 课题编号： 课题名称： 课题负责： 子课题名： 子课题号： 子课题人： ：项目：’’位羟基的羧基化(一) 试验人员：试验负责：报告日期：200计数月份：200年月 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 （0.9-1.0） 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计，实施实验，记载，分析清晰，结论清晰文献完整，发表水平 福建省农业科学院研究所 研究中心 电话: 0591 传真: 0591 试验目的 阿维菌素，是由日本北里大学大村智等和美国Merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，由链霉菌中灰色链霉菌Streptomyces avermitilis）发酵产生。’’位羟基上。 多位点生物杀虫剂BtA的研究基于多位点杀虫毒素的理论，利用生物藕合技术，将Bt的伴孢晶体进行酶切改造，形成带末端氨基的原毒素，将阿维菌素上的羟基进行激活、衍生化，形成带羧基的阿维菌素衍生物，最后利用偶联剂EDC进行藕合。本实验目的就是对C-5位羟基被保护过的阿维菌素衍生物的C-4’’位羟基进行改造，使其羧基化，以便进行后面的藕合反应。由于相关的介绍阿维菌素C-4’’位羟基羧基化的文献很少，故本次实验其实是一种羧基化方法的探索实验。 此次试验中采用的是丁二酸酯化法。酯化即氧原子上的酰化反应，产物酯种类繁多，广泛用于溶剂、香料、医药、农药、增塑剂等。酯化的方法甚多，根据合成的实际需要可采用以羧酸、酰氯、酸酐等为酰化剂使羟基化合物酯化的方法；亦可采用羧酸盐与卤化物的酯化法；酯交换法；腈和醇的酯化法以及烯、炔类和羧酸的加成酯化法等另外，酯化反应都是可逆反应，反应速度一般都较慢，在常温下不易觉察，即使在回流速度也很慢，不能用于制备，因此必须加催化剂才能加速反应，DCC催化酯化效率很高，但由于DCC遇水并会析出，难以去除，给产物的提纯提高难度。EDC.HCL则在保持DCC高效催化的基础上，对DCC的末端进行改良，提高其水溶性，用水萃取即可去除，简单高效。且EDC.HCl催化，反应条件温和，高效，对原料的结构构象影响较小。DMAP是酯化反应优良的催化剂，故本实验采用EDC.HCl和DMAP联用的催化条件，进行C-4’’位羟基的缩合酯化。 2. 试验方法 2.1 试验材料 2.1.1试剂 C-5位被TBDMS-Cl保护的阿维菌素，EDC.HCl，催化剂DMAP，丁二酸，甲醇，二氯甲烷，四氢呋喃，乙酸乙酯，甲醇，无水硫酸钠 2.1.2 实验器具及仪器锥形瓶2.2 C-4’’位羟基的羧基化 2.2.1 按1：1.2：2的摩尔数比例分别称取丁二酸、阿维菌素衍生物及EDC.HCl。 2.2.2 称取的丁二酸置于圆底反应瓶中，N2保护，溶解于重蒸过的二氯甲烷。 2.2.3称取EDC.HCl，N2保护，溶解于重蒸过的二氯甲烷。然后在0℃下缓慢加入到丁二酸中,活化半小时。 2.2.4称取阿维菌素衍生物，并加入少量的催化剂DMAP，N2保护，溶解于重蒸过的二氯甲烷，0℃下缓慢滴入已活化的丁二酸中，避光搅拌反应过夜 2.2.5 薄层硅胶板染色液的配置：取硫酸铈10g，浓硫酸32.5ml，磷钼酸25g，混合均匀，并加水稀释至800ml。 3. 试验结果 图1所示，反应物点比原料点在起点处多了一个点，没有跑起来，故我们加大层析液的极性，并加一个DMAP的对照点，结果如图2所示。我们可以知道，反应物在起点处的点为DMAP点，不是产物点，没有新的产物点出现或产物很少。 4. 试验结论 参考文献 Egerton JR, Ostlind DA, Blair LC,et al. Avermectins , new family of potent anthelmintic agents: efficacy of the B1a component [J]. Antimicrob Agents Chemother,1979,15: 372-378. 2) Albers-Schênberg G, Arison BH, Chabala JC, et al. Avermectins. Structure Determination [J]. J. Am. Chem. Soc., 1981,103: 4216-4221. 3) Fisher MH. Recent advance in avermectin research [J]. Pure Appl. Chem,1990, 62(7):1231-1240. 试验设