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一、实验动物抓取与固定的原则.doc
一、实验动物抓取与固定的原则
爱护动物的原则,避免抓取时对动物造成疼痛、不适、不安及其他应急反应。
选择最适合实验动物的固定方法。危险情人早固定。
小鼠抓取用右手拇指和食指抓住尾部中央捏起来用手固定时把捏起来的小鼠放在笼子盖上,在动物向前挣的一瞬间,用左手的拇指和食指翻转抓住颈背部的左手,右手拉住小白鼠尾部再用左手的小指压住尾根部使小鼠整个呈一在无麻醉的情况下首先根据上述方法用左手将小鼠固定用乙醚麻醉,用长20~30CM的线绳分准备一个15~20cm的方木板边缘楔入5个钉子把捆四肢的线绳固定到固定台的钉子上固定并且在头部上颚切齿的地方牵一根线绳静脉给药时,容器,把小鼠放在里面只露出尾巴,。特殊实验进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。大鼠沙鼠左手食指颈背部拇指及其余3指放在胁部食指和中指挟住左受试动物给药时,用左手的拇指和食指抓住颈背部皮肤.其余3指抓住背部皮肤,小4~5周龄以内的大鼠同小鼠一样抓住尾部提起来。周龄较大的大鼠尾部皮肤因为容易被剥
四、小鼠、大鼠和沙鼠性别鉴定的操作程序
按照大鼠、小鼠和沙鼠的抓取与固定操作程序抓取动物;
反转以上被抓取的动物,观察其外生殖器(阴蒂或阴茎与肛门之间的距离阴蒂或阴茎与肛门之间的距离间隔短的成熟期雌性有管充盈消毒后,用无菌纱布擦干将尾尖剪去约5,从根10余次。小鼠每次可采1ml,大鼠约04ml。切割尾动脉或尾静脉 用锋利刀在尾静脉或尾动脉切开一小口,血液自行流出几尾静脉穿刺管充盈用注射器往外抽血。此(二) 眼眶后静脉丛采血7~lO长的玻璃取血管,其前端内径为l~1lcm即可,将其尖端折断,使其锋利将取血管浸入l%肝素溶液,干燥后使用采时,左手拇指及指轻轻向眼底方向剌入,小鼠刺入2~3mm深,大鼠剌入4~5mm深感到有阻力用消毒纱布轻压眼部片刻,3~7d采血部位大致修复小鼠一次可采血0.0.3ml。.大鼠一次可采血05~1Oml。(三) 心脏采血穿刺法 动物乙醚吸入麻醉仰卧位固定剪去心前区毛消毒皮肤3~4肋间用左手指摸到心搏最强处右手持注射器垂直胸壁由此进针当感到有开胸法动物乙醚吸入麻醉打开胸腔,直接从心脏内抽血亦可剪破心脏,直接用注射器或吸
(四) 大血管采血麻醉的动物固定分离暴露颈静脉、颈动脉或股动脉、股静脉用注射器穿刺抽出
(五) 摘除眼球采血常用于鼠类大量采血用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球突出右
(六)断头采血用剪刀迅速剪掉动物头部,立即将动物头颈朝下提起动物,血液可流入已准备好的容
表采血部位及采血量 部位 小鼠 大鼠 尾静脉 O03~O05 0.3~05 麻醉(不麻醉亦可) 尾动脉 O1~O3 O.5~1O 足背中静脉 01~O3 眼窝静脉丛 O05~O1
O.5~O8 O.5~1O
3~5 全采血 颈静脉 O.5~1O 3~5 颈动脉 O.5~1O 同上 O.5~1O 5~10(不麻醉亦可) O.5~O8 3~ 后大静脉 O.5~1O 2~同上 5~同上 Atipamezole(1 mg/kg, ip或sc)可以拮抗美托咪定的作用,纳布啡(0.1 mg/kg, iv; 1 mg/kg, ip或sc)、布托啡诺(0.1 mg/kg, iv; 2 mg/kg, ip或sc)可拮抗芬太尼的作用。
(3)第三种有效的方法是使用美托咪定(0.5 mg/kg, ip)或赛拉嗪(10 mg/kg, ip),和氯胺酮(75 mg/kg, ip)混合于同一注射器应用,可提供良好的手术麻醉效果。这种联合用药可产生30分钟的手术麻醉效果,用Atipamezole(1 mg/kg, ip或sc)可拮抗部分麻醉作用,但早期逆转(诱导后10-20分钟),因氯胺酮的作用可能会伴有行为混乱。
(4)如果可以静脉注射给药,则可以用异丙酚(10 mg/kg, iv)来进行麻醉,适用于持续静脉维持以产生稳定、持久的麻醉效果。通过腹腔注射给药效果布肯定。
(5)硫喷妥钠(30 mg/kg, iv,1.25%溶液)或甲己炔巴比妥(10-15 mg/kg, iv, 1%溶液)可产生5-10分钟的麻醉。
(6)戊巴比妥应稀释为30 mg/ml的溶液,以40-50 mg/kg经腹腔注射给药。在麻醉开始时常伴有严重的呼吸抑制,可导致较高的死亡率下,故这种药应尽可能避免用于大鼠。
2. 吸入麻醉
对于大鼠,最方便的用具是由有机玻璃制成的麻醉箱,可以诱导时观察动物,麻醉蒸汽由麻醉机供给,且这个麻醉箱应设有气体清除装置或与之相通的通气系统通道,以去除过量的麻醉气体。麻醉诱导后应从麻醉室中移出大鼠,用与麻醉机相连的小面罩维持麻醉。
3. 气管插管和机械通气
类似小鼠。
4. 麻醉管理
同小鼠一样,防止体温降低特别重要。较为理想
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