三七皂甙对阿霉素所致的小鼠骨髓细胞微核的影响(全).docVIP

三七皂甙对阿霉素所致的小鼠骨髓细胞微核率的影响 常 征 （云南师范大学，生命科学院，文山学院，生化系 云南文山663000） [摘要]：目的　研究三七皂甙对阿霉素诱导的小鼠骨髓细胞微核率的影响。方法　将42只小鼠随机分成7个组，每组6只，雌雄各半。阴性对照组（CKn）和阳性对照组（CKp）每天灌胃生理盐水一次，其余5组分别以12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg的剂量每天灌胃PNS一次，所有7个组都连续灌胃7d，最后一次灌胃后CKn腹腔注射生理盐水一次，其余各组以80%LD50的DXR剂量分别腹腔注射一次。给药结束48h后取小鼠骨髓进行微核分析，评价三七皂甙对阿霉素诱导的小鼠骨髓细胞微核率的影响。结果　PNS12.5组的微核率显著高于CKn组和显著低于其他各给药组和CKp组（P0.05）；PNS25组和PNS50组的显著高于CKn组、PNS12.5组和显著低于CKp组（P0.05）；PNS100组和PNS200组的微核率虽然和CKp组的没有显著差异（P0.05）。结论 低剂量的PNS具有一定的保护染色体不受损伤的作用。 [关键词]：三七皂甙；阿霉素；小白鼠；腹腔注射；微核率 三七(Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen)为五加科(Araliaceae) 人参属（Panax）多年生草本植物[1]，别名参三七、山漆、田七等，主产于云南、广西及四川等地。在植物分类上，与人参、西洋参(花旗参)同属于五加科人参属，其体细胞染色体数目为2n=24,核型公式为K(2n)=2x=24=24m，属于“1B”型,全部都属于中部着丝粒染色体,核型为对称型[2]；三七属半阴性多年生的宿根草本植物，是中国特有的名贵中药材，起源于2500万年前第三纪古亚热带山区，由于其对生长环境条件有特殊要求，现仅存于中国西南山区。据有关文献记载，三七使用历史近600年，栽培历史近500年，因其自古以来就被公认为具有显著的活血化瘀、消肿定痛功效而被誉为“金不换”和“南国神草”等。 三七主要含有三萜皂甙、三七素、黄酮、挥发油、氨基酸、糖类及各种微量元素等，其中皂苷类是三七主要生理活性成分,含量高达12%[3]，它由三萜皂甙元和糖经糖苷键连接而成的配糖体，它广泛存在于自然界，尤以双子叶植物中分布最多，迄今,已从三七全株中分离到20多种达玛烷型四环三萜皂苷。在植物中，皂甙的主要功能是防御病原体和害虫。然而，最引人注目的是它们具有抗肿瘤、抗病毒、降低胆固醇等多种生物活性，有着相当可观的药用商业价值[4]。现代化学和药理学研究发现三七皂苷(Panax notoginosides, PNS)在耐缺氧、抗衰老、提高机体免疫力等方面的药理作用显著优于人参总皂苷,且PNS和部分单体皂苷在血液系统、心脑血管系统、神经系统、物质代谢以及抗炎、抗肿瘤等方面均有较好活性[5]。但在对抗60Coγ射线照射引起的骨髓嗜多染红细胞微核率增加方面作用不显著[6]，而三七皂苷Rg1对环磷酰胺诱导的小鼠骨髓细胞微核发生率和对丝裂霉素诱导的小鼠睾丸染色体畸变均有明显的抑制作用[7]。而对阿霉素所致的小鼠骨髓细胞微核率的影响方面尚未见报道。 阿霉素(Doxorubicin, DXR)——也叫亚德里亚霉素，属蒽环类药物，它被用作一种高效、广谱的抗肿瘤药物已有近40年的历史，它对乳腺癌、食道癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、骨肉瘤、Kaposi肉瘤和软组织肉瘤均有较好的疗效[8]。阿霉素具有抑制DNA合成的能力[9] ，还具有引起DNA链断裂的潜能 [10,11]；阿霉素的细胞毒性作用可能通过各种各样的机制发生，如自由基的形成[10]、DNA的绑定[12]、拓扑异构酶II的失活[9,13]等等。先前的研究显示，阿霉素能诱导正常细胞和肿瘤细胞发生突变和染色体畸变[9,14,15]。而检测染色体损伤最方便、快速的方法就是小鼠微核试验。 微核（micronucleus, 简称MN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。七花有限责任公司12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg的剂量每天灌胃PNS一次，所有7个组都连续灌胃7d[26，27]，最后一次灌胃后CKn腹腔注射生理盐水一次，其余各组以80%LD50的DXR剂量分别腹腔注射一次，注射量为0.1~0.2ml/10g体重[23]。给药结束后48 h用颈椎脱臼法处死、取样，进行小鼠骨髓细胞微核实验。 小鼠骨髓细胞微核实验方法参照了肖福英[16] 、Makoto Haya