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项目一 光学显微镜使用技术 技能目标 光学显微镜是一种将肉眼不可见的微小物体或物体未息部分的形状及其结构变为可见物体的精密光学仪器。通过实训,使学生光学显微镜的结构和各部份功能、显微镜的使用技术;能规范并较熟练地运用显微镜观察植物材料;具有一定的显微镜保养能力,为观察植物细胞结构和微生物奠定基础。 教学资源 1、仪器设备 显微镜。 2、材料与工具 二甲苯、任意一种植物切片、擦镜纸或小绸布。 3、实训场所 实验室。 4、师资配备 每20名学生配备一位指导教师。 原理、知识 光学显微镜的各类很多,但基本结构大致相同,可分为光学系统和机械系统两大部分。 (一)光学显微镜构造 1、机械系统 由镜座、镜臂、载物台、镜筒、转换盘和调节轮等组成。机械系统相当于显微镜“硬件”,为观察、载物提供了一个平台。 (1)镜座用以稳固和支持镜体。 (2)镜臂弯曲如臂,是取送显微镜时手握的部位。 (3)载物体是用于放置玻片标本的平台。压片夹用来压住载玻片。 (4)镜筒为显微镜上部圆形中空的长筒,筒口上端安装目镜,下端与物镜转换器相连。其作用是保护成像的光路与亮度。 (5)转换器固着在镜筒的下端,分两层。上层固着不动,下层可自由转动, 可以换用放大率不同的接物镜。 (6)粗微调节轮用以调节焦距。 2、光学系统 由接目镜、接物镜、聚光器、光源的组成。 (1)接目镜、接物镜具有放大的作用。 (2)聚光器可以集合由下面光源投射来的光线。 (3)光源通常采用高亮度、高效率的卤素灯和非球面聚光灯。 (二)光化学显微镜的放大倍数及计算方法 一般显微镜备有几个放大倍数不同的目镜,其放大倍数刻在边框上,如5×、10×、15×等。 显微镜的总放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数 (三)光学显微镜的使用要求 光学显微镜是一种精密贵重的仪器,使用时要细心爱护,妥善保养,做到严格执行操作规程;保持显微镜和室内的清洁、干燥;防治震动;不得任意拆卸或调换显微镜的零部件;使用过的油镜头或镜头上沾有不易搽去的污物,可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭,再换用洁净的擦镜纸擦拭干净。 操作方法及考核标准 (一)操作方法与步骤 1、取镜与安放 拿取显微镜时,必须一手紧握镜臂,一手平托镜座,镜体竖直不可倾斜,然后轻轻放在距试验台沿内6~7cm左右的偏左位置上;检查显微镜的各部分是否完好;镜体上的灰尘用绸布擦拭,镜头只能用擦拭纸擦拭。 2、对光 使用时,先将低倍接物镜头转到载物台中央卡住,使之正对通光孔。用眼接近接目镜观察,同时用手调节聚光器,或选用光圈盘合适的孔,使境内光亮适宜。境内所见光亮的圆面叫视野。一般用低倍镜,光线宜暗些,观察透明物体或未经染色的活体材料,光线也宜暗些。 3、放片 将切片放在载物体上,使要观察的部分对准接物镜头,用压片固定切片。 4、低倍接物镜的使用 转动粗调节轮,使载物台上升,直到低倍物镜距标本5mm左右。 用两眼从目镜中观察,用手慢慢转动粗调节轮,使载物台渐渐上升,直到看清视野内的物象为止。改用微调节轮,改用慢调节轮,稍加调节焦距,使物象最清晰。 用手前后左右轻移玻片标本或调节玻片移动器,便可找到欲观察的部位,但要注意视野中的物象为倒像,移动玻片时应向相反方向移动。 5、高倍接物镜的使用 使用高倍接物镜时,首先用低倍接物镜按上述方法调好,然后将要放大观察的部分移至视野中央,旋转物镜转换器,把高倍接物镜移到正确位置上,便可粗略看到物象,再用细调节轮调制物象清晰为止。对其性能上不熟悉时,可在完成低倍镜观察后,稍微调节载物台,把高倍物镜转换至工作位置,然后冲旁观察,小心地慢慢调节载物台,用微调节轮调节寻找目标,直到物象清晰为止。 使用高倍物镜时,用于物镜与标本之间距离很近,因此要特别仔细,不能用粗调节轮,只能用微调节轮。 6、还镜 使用完毕,应先将接物镜移开,再取下切片,把显微镜擦拭干净,使低倍接物镜传至中央通光孔,下降镜筒,使接物镜接近载物台,各部分恢复原位。将反光传直,镜体覆盖绸布后并套上棉布袋,放回箱内并上锁。 (二)技能考核标准 考核项目 考核内容 操作评分标准 器材设备 分值 扣分依据 显微镜使用及组织切片识别 (100分) 、主要部件名称、显微镜的提取、调光 、置片、观察 、组织切片的识别(抽取三个) 6、还原、装箱 部件名称准确 正确提取显微镜 调光准确熟练 切片观察、先低倍后高倍判断切片的组织名称 还原 熟练程度、用时 20 5 10 15 30 10 10 说错或少说一个部位扣2分 每错一步扣2分 不规范、视野光线不佳扣5分 物象不清晰扣5分、操作不规范扣5分 每识别错误一种组织切片扣10分 不规范酌情扣1-5分 不熟练扣1-10分,每超1分钟扣2分 15分钟 生物显微镜、组织切片(小肠
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