生物工程分析的基础知识.ppt

第2章 生物工程分析的基础知识 2.1 概述 2.2 分析样品的采集、制备及保存 2.3 样品的预处理 2.4 生化产品检验与分析方法的评价 1.误差及分析方法的选择 2.数据处理与质量控制 2.1 概述 1.样品分析流程: 样品的采集、制备和保存，样品的预处理，成分检验与分析，数据处理，整理报告。 2. 样品前处理的评价准则: (1)是否能最大限度地除去干扰物 (2)被测组分的回收率是否高 (3)操作是否简便、省时 (4)成本是否低廉 (5)对人体和环境是否产生影响 2.2?样品的采集、制备及保存 一.样品的采集 1.定义:从大量的分析对象中抽取有代表性的部分样品作为分析样品的工作。 2.正确采样，必须遵守的原则：代表性 （一）.采集的样品要均匀，有代表性，能反应全部被测生化产品的组份，质量和卫生状况；(正确划分取样单元和确定取样点是十分重要的) （二）. 采样过程中要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。 1.颗粒状样品(粉状生化产品) 对于这些样品采样时应从某个角落，上中下各取一类，然后混合；用四分法得平均样品。 2.半固体样品（如蜂蜜，稀奶油） 用采样器从上中下分别取出检样混合后得平均样品。 3.液体样品 液体样品，先混合均匀，用吸法分层取样每层取500ml，装入瓶中混匀得平均样品。 4.小包装的样品 对于小包装的样品是连包装一起取（如罐头，奶粉）一般按生产班次取样，取样数为1/3000，尾数超过1000的多取1罐，但是每天每个品种取样数不得少于3罐。 5.不均匀的样品 6.生物活性样品的采集: (1)生物材料的采集尽可能地接近正常状态下获得组织和器官。必须快速，及时速冻、低温保存 (2)血样采集用得较多的方法是静脉采血 (3)尿样通常取在规定时间内的尿液 (4)唾液采样一般是在漱口后15 min,收集口内自然流出或舌在口腔内搅动后流出的混合唾液 二. 样品的制备 1.样品的制备目的：使样品充分代表待测样品的性质 2.样品的制备 (粉碎、混匀和缩分）方法： ①摇动或搅拌（液体样品，浆体，悬浮液体）???? （用玻璃棒、电动搅拌器、电磁搅拌） ②切细或搅碎 （固体样品） ③研磨或用捣碎机 目前一般都用高速组织捣碎机进行样品的制备。 2.3 样品的预处理 一. 预处理目的: 排除测定干扰因素；浓缩测定物质 (1)提高灵敏度和降低检测限 (2)提高测试精度 (3)提高方法的选择性 (4)使样品易保存和运输 (5)延长测试仪器的使用寿命 二.预处理方法分类： 1.溶解法 2.蒸馏法 3.有机物破坏法???? ①干法灰化?? 避免测定物质的散失，加碱或酸 ②湿法消化 4.溶剂提取法 ①溶剂分层法②浸泡法③盐析?????? 5.色层分离法 6.其它的生化分离提纯技术 2.4 生化产品检验与分析方法的评价 一.分析方法的评价指标 在研究一个分析方法的好坏时，通常用精密度、准确度和灵敏度三项指标评定。此外还考虑线性和线性范围、耐用性等。 二.实验误差的表示方法 （4）数据理论评估标准偏差 质量控制图 在工业生产的质量控制和日常分析测试数据的有效性时,常用质量控制图。 三. 提高分析精确度的方法(控制和消除误差的方法) 1. 正确选取样品的量 2. 增加平行测定次数 3. 对照实验 4. 空白实验 5. 回收实验 6. 校正仪器和标定试剂 7. 严格遵守操作规程 8. 水质的要求 水质的要求 由于普通蒸馏水含有CO2，挥发性酸、氨和微量元素金属离子等，所以进行灵敏度高的微量元素的测定时往往将蒸馏水作特殊处理，一般采用硬脂全玻璃重蒸一次，或用离子交换纯水器处理。 四.分析方法的选择应考虑的因素: 1.分析要求的准确度、精密度和灵敏度 2.分析方法的繁简和速度 3.样品的特性 4.现在条件 作业题: 1.评价分析方法的好坏标准有哪些? 2.选择分析方法时应考虑哪些因素? 3.名词解释: 精密度 准确度 回收实验 空白实验 对照实验 变异系数 μ μ-2 σ μ-3 σ μ+3σ μ+2σ 回归曲线 continue 3.对照实验: 标样与测样结果对照;不同人员检验结果对照 可检测方法的系统误差 4.空白试验：不加入待测样品，其它的测定过程、方法和试剂均与测定样品相同的试验。 可抵消由于试剂中杂质的干扰等因素造成的系统误差。 回收试验:目的是衡量分析方法的准确度。 1.方法:在样品中加入一定量被测物质，然后用同样方法测定，测得值与理论值之比乘以100%即为回收率，合格的回收率应为100%±5 %。 2.计算 回收浓度＝分析标本测得浓度－基础标本测得浓度 加入浓度＝ 标准液量（ml） ×标准液浓 样