生物实验知识点.docVIP

实验一：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一??P7） 一．方法步骤：?????? 第一步：转动反光镜使视野明亮 第二步：在低倍镜下观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央 第三步：用转换器转过高倍物镜，并用细准焦螺旋调焦 问（1）是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？ 低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。 实验二：物质鉴定（必修一? P18） 实验原理：还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀? ?? 脂 肪 + 苏丹III→ 橘黄色?? 脂 肪 + 苏丹IV→ 红色 ?????????? 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 2、脂肪的检测?? （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 → 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）→ ?制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） →? 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 3、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)???? ?? 考点提示： （1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 （2 )还原性糖植物组织取材条件？ 含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 （3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 （4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 （5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为： 浅蓝色→棕色→砖红色 （6）花生种子切片为何要薄？? 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 （7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？?切片的厚薄不均匀。 （8）脂肪鉴定中乙醇作用？?洗去浮色。 （9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化？不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三：观察DNA和RNA在细胞中的分布（必修一? P26） 1．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法 2、实验原理：? （1）基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色. （2）盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合. 3.方法步骤：? 实验材料：人的口腔上皮细胞 实验步骤：制片-水解-冲洗-染色-观察 水解：8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min。改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色。 染色：2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min。 实验结果（现象）:细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验结论（分布）：真核生物DNA主要分布在细胞核中（线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA）；RNA主要分布在细胞质中。 实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47） 一．实验原理：?? 叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。 二．实验材料：观察叶绿体选用：藓类的叶、黑藻的叶。原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚， 若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉，因为表皮细胞不含叶绿体。 三．方法步骤： 观察叶绿体不需要染色，取带叶肉细胞的叶片直接显微镜观察。 观察线粒体需要染色，去无色的口腔上皮细胞，健那绿染色，显微镜观察。? 讨论：1、细胞质基质