薄层色谱的必威体育精装版应用与进展资料.docVIP

成绩 批阅人 2014-2015第一学期 课程考查论文 课程名称：现代分离方法与技术 论文标题：薄层色谱的必威体育精装版应用及进展 1.3加压薄层色谱 加压薄层色谱(OPLC)是指在水平的薄层色谱板上施加一弹性气垫。展开剂不是靠毛细 作用力 ,而是靠泵压被强制流动,因此可以采用更细颗粒的吸附剂和更长的色谱板,分离所需 时间缩短,扩散效应减小, 分离效果更好。 　 1.4离心薄层色谱 　 离心薄层色谱(CTLC)又叫旋转薄层色谱, 是一种离心型连续洗脱的环形薄层色谱分离技 术 ,主要是在经典的薄层色谱基础上运用离心力促使流动相加速流动。离心力用于分离, 可以 减少破坏,对沸点高、分子量大的化合物有利 ,可用于分离 100mg左右的样品 。使用商品化生 产的离心薄层色谱仪 ,仪器结构简单 。尽管其分辨率低于制备型 HPLC, 但操作简便 ,分离时 间短, 并且无须将吸附剂刮下即可将产物洗脱下来 ,广泛应用于合成和天然产物的制备分离。采用离心薄层色谱法提取大豆磷脂酰胆碱 (SPC), 速度快, 溶剂消耗量少, 制备样品 量大,成本低。用硅胶GF254、和CaSO4.H2O,加聚丙烯酸钠水溶液混合均匀,铺制薄层盘,烘干,薄层盘可重复使用5次以上,洗脱液:CHC l 3- CH3OH- H2O。 2.薄层色谱检测方法 薄层色谱的定量检测有吸收测定法、荧光测定法和荧光猝灭法。对在可见及紫外光区有 吸收的化合物可用钨灯和氘灯在 200 ～ 800nm范围进行透射和反射吸收法测定。化合物本身 或者经过色谱前和色谱后衍生化生成对紫外有吸收并能放出更长波长的化合物适用荧光法测量,荧光法灵敏度高, 最低可测至 pg级。本身无颜色、又无特征紫外吸收或荧光, 并且不易衍生的化合物可采用荧光猝灭法测量, 使用含有荧光剂的薄层板。薄层色谱扫描仪的常见扫描方式有直线扫描、锯齿扫描、飞点扫描、圆形扫描、倾斜扫描和多通道自动扫描等, 分别采用单 波长或双波长的测光形式。除此之外 ,薄层色谱还可与其他分离分析技术联用, 更有利于化合物的定性鉴别和定量检测。 2.1薄层色谱-傅立叶变换红外光谱联用检测 　　 化合物的红外光谱能提供丰富的结构信息 ,是定性的有力手段 ,也可以用于定量 。目前薄层色谱和红外技术联用主要采用原位法、光声光谱检测法(PAS)、自动洗脱物转移法和红外显 微镜法[ 11 ] 。原位法是采用改装DRIFTS附件, 由步进马达驱动TLC板, 对色谱斑点进行红外测量。由于TLC固定相有强红外吸收 ,分析物吸收带容易发生畸变。光声光谱法是将TLC板上附着有分析物的固定相依次转移到PAS附件中进行FT IR-PAS分析, 再用差谱方法扣除固定相的吸收,得到分析物光谱图。同原位一样,固定相的强红外吸收会对分析物光谱产生干 扰。自动洗脱转移法使用TLC-FTIR自动接口。样品在常规板上展开后,将板旋转90°,用螺 丝固定在带有样品杯的金属部件上, 杯中充有KBr或KCl粉末,杯底部的金属丝芯和TLC板 接触, 将板置于转移附件里 ,展开的各组分会被转移附件罐里的溶剂推向顶部 ,借助金属丝芯 的毛细作用进入杯中。转移完 ,用干燥空气流吹洗各样品杯表面,使杯中溶剂挥发, 组分沉积 在杯顶部的KBr表面上,最后进行红外扫描。红外显微镜法是用氧化钴作固定相涂在显微镜载片上,样品在氧化钴上展开后直接用红外显微镜测量, 用氧化钴代替硅胶和氧化铝 ,可消除 固定相的干扰。 2.2薄层色谱-拉曼光谱联用 检测拉曼光谱和红外光谱都属分子振动光谱,前者为散射光谱,后者为吸收光谱,分子偶极矩越大, 红外吸收强度越大;振动时分子极化率改变越大, 拉曼散射越强, 所以通过两种光谱的相互配合、补充,可以更好地解决化合物结构测定问题。薄层色谱和表面增强拉曼光谱(SERS)联用较多。表面增强拉曼要求检测的分子必须含有芳环、杂环、氮原子、硝基、氨基、羧酸基以及磷、硫原子, 因为这些基团可通过孤电子对或π电子与表面增强基底相互作用,从而产生拉曼散射增强效应 ,样品用量可低至数微克。常用表面增强基底为银溶胶 ,通过硝酸银、柠檬酸三钠经氧化-还原反应制备 ,该银胶具有很强的表面 增强活性,滴洒在薄层斑点原位 ,水分挥发干后测 FT-SERS谱 。 应用 TLC- FT-SERS技术对天然药物 钩藤生物碱中一对异构体 (钩藤碱与异钩藤碱 )进行高灵敏度的分离和斑点原位特征拉曼光 谱检测 ;并应用 TLC- FT-SERS技术原位斑点获得中草药麻黄中麻黄生物碱衍生物中一对关于手性碳的光学异构体 (去甲基麻黄碱和去甲基伪麻黄碱 )的指纹光谱,原位样品仅需 16μg 。 便携式薄层色谱━拉曼光谱联用仪 2.3薄层色谱-质谱联用 　　 相比其他联用技术,质谱是一种灵敏度高、选择性好、可提供丰富的组成和结