DNA重组技术的基本工具(上课99).ppt

DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸分子的什么部位？ 三、DNA连接酶——“分子缝合针” CTTAA G AATTC G 磷酸二酯键 1.作用部位： 磷酸二酯键 种类 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 连接末端类型 共性 T4噬菌体 大肠杆菌 黏性末端 黏性末端，平末端 连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。 三、DNA连接酶——“分子缝合针” 2.种类： DNA连接酶 DNA聚合酶 相同点 作用实质 化学本质 不 同 点 模板 作用对象 作用结果 用途 都能催化形成磷酸二酯键 都是蛋白质 不需要 需要 形成完整的重组DNA分子 形成DNA的一条链 基因工程 DNA复制 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 只能将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键 在两个双链DNA片段之间形成磷酸二酯键 C T A A G C T T C A C T T C A A G T C G C A A G C T T C T G A T T C G A A G T G A A G T T C A G C G T T C G A A G A T A G A A T T C G C T G G A A A G C T T C G A T C C G A C A T C T T A A G C G A C C T T T C G A A G C T A G G C T G 限制酶：HIDIII A ↓ AGCTT EcoR I G ↓ AATTC 目的基因 质粒 请选择合适的限制酶切割目的基因 2．在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中，下列哪组是所需要的 ①同一种限制酶切割两者； ②不需同一种限制酶切割两者； ③加入适量的DNA连接酶； ④不需加DNA连接酶 A．①③ B．①④ C．②④ D．②③ 练一练 3.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸是否可行? 练一练 思考与探究答案 （2）和（7）能连接形成…ACGT… …TGCA…; （4）和（8）能连接形成…GAATTC… …CTTAAG…; （3）和（6）能连接形成…GCGC… …CGCG…; 1. （1）和（5）能连接形成…CTGCAG… …GACGTC…。 G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 磷酸二酯键 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 特点：单链凸出 什么叫黏性末端？ * 仔细观察各限制酶识别的特定序列有何 特点？ 限制酶的识别序列 限制酶所识别的序列的特点是：无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列 A T T G A A T T C A A T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 * 据高考考纲要求选择的，选修的特点：各专题间联系不大或者说无联系，所以它没有象必修模块那样的系统性---用一个知识网络可以将一本书联系起来。 * 在本模块我们更深入的学习：基因工程的具体操作步骤、及基因工程应用等知识。 * 抗体是什么？ * * 英国日前培育出三个爹娘一个娃的胚胎，引起争议。每对父母都希望孕育出聪明健康的宝宝，但一些先天的基因疾病却会给整个家庭带来。英国科学家 日前利用一男二女的基因、通过“去劣存优”培育出了一批“三合一”胚胎。这项技术如果最终取得成功，将令很多婴儿免受遗传性疾病之苦。不过，人们对“基因改造婴儿”的担忧也随之而来 通过本模块的学习：让大家了解生物科学最前沿的知识及发展前景与应用，理解为何科学家预言21世纪是生物科学世纪？同时培养大家 搜集信息的能力、用科学的态度来看待科学成果、并指导如何应用它才能造福于人类。 * 通过本模块的学习掌握前沿生物科学，你能理解为何科学家称：“21世纪是生物学世纪”？因为人类面临的许多生存危机都最终需要生物科学来解决。 在学习知识的同时培养多种能力，如：学会信息搜集整理的能力．科学的分析生物问题＼生物现象、怎样发展科学