荧光相的关光谱fcs在生物活细胞中的应用.pdfVIP

第 卷 第 期 湖北大学学报（自然科学版） 27 1 VOI .27 NO . 1 年 月 （ ） ， 2005 3 JOurnaI Of Hubei University NaturaI Science Mar . 2005 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 文章编号： （ ） 1000 - 2375 2005 01 - 0053 - 04 荧光相关光谱（ ）在生物活细胞中的应用 !# 游 俊 （华中科技大学 生命科学与技术学院，湖北 武汉430074 ） 摘 要：除了传统的分子浓度和扩散时间的测量荧光相关光谱（ ），还可测量分子动力学或化学反应 FCS 的动力参数 但是由于分子相互作用网络的复杂性， 在生物活细胞中的应用还有许多问题和困难需要解 . FCS 决 探讨了 在生物活体中分子相互作用网络、细胞膜、膜表面受体、细胞内结构分析以及胞内动力学研究 . FCS 等方面的应用. 关键词：荧光相关光谱（ ）；活细胞；问题；应用 FCS 中图分类号： ； 文献标志码： @503 @ - 334 A 荧光相关光谱（ ）是一种统计小样本中荧光分子的荧光强度波动的相关分析方法 在这种方法 FCS . ［］ 1 的经典模式中 ，样本体积被聚焦激光束和共焦小孔所限定 样本发出的荧光被高数值孔径的显微镜物 . 镜所收集，然后被灵敏的单光子计数器所监测 被探测到的荧光是随时间波动的，且这些时间函数是自 . 相关的. 归一化的荧光波动自相关函数提供了两类信息，函数的大小反比于所观测的荧光分子的平均数 量，时间衰退的速率和形态反映了所观测的荧光分子的动力学特征. 发明FCS 的最初目的是在生物系统中研究非常稀的样本浓度的化学动力学特征，例如研究嗅乙非 啶溴化物与 间的可逆接合反应，嗅乙非啶溴化物是一种可发荧光的核酸合成抑制剂 之后的一些 DNA . 理论和实验研究证明FCS 不但能够测量扩散系数，而且能够测量化学速率常数、浓度、聚合和旋转动力 学参数 在此基础上 等（ ）将共聚焦显微镜几何学引入到 中，使得细胞膜中脂质扩散研究 . KOppeI 1976 FCS 取得了巨大进展，这项方法沿用至今.