炼乳理化指标测定.docVIP

食品分析综合性实验 炼乳的理化指标测定 炼乳的理化指标测定 一、实验目的 1.通过对市面上炼乳的蛋白质、水分、酸度灰分的测定来炼乳的品质 2.掌握食品分析的方法熟悉食品分析的基本步骤。 实验内容 炼乳中蛋白质的测定（GB 50095-2010 分光光度法） 1.1原理 1.2试剂 硫酸铜（CuSO4·5H2O） 硫酸钾（K2SO4） 硫酸（H2SO4 密度为 1.84 g/L） 氢氧化钠溶液（300 g/L） 对硝基苯酚指示剂溶液（1 g/L） 乙酸溶液（1 mol/L） 乙酸钠溶液（1 mol/L） 乙酸钠-乙酸缓冲溶液 显色剂 氨氮标准储备溶液（以氮计）（1.0 g/L） 氨氮标准使用溶液（0.1 g/L） 1.3仪器 1.4步骤 1.4.1试样消解 称取炼乳试样 0.2 g～1 g（精确至 0.001 g），移入干燥的 100 mL 或 250 mL定氮瓶中，加入 0.1 g硫酸铜、1 g硫酸钾及 5 mL 硫酸，摇匀后于瓶口放一小漏斗，将定氮瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。缓慢加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热半小时。取下放冷，慢慢加入 20 mL水，放冷后移入 50 mL 或 100 mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。按同一方法做试剂空白试验。 1.4.2试样溶液的制备 吸取 2.00 mL～5.00 mL 试样或试剂空白消化液于 50 mL 或 100 mL 容量瓶内， 加 1 滴～2滴对硝基苯酚指示剂溶液，摇匀后滴加氢氧化钠溶液中和至黄色，再滴加乙酸溶液至溶液无色，用水稀释至刻度，混匀。 1.4.3标准曲线的绘制 吸取 0.00 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL 和 1.00 mL 氨氮标准使用溶液（相当于 0.00 μg、5.00 μg、10.0 μg 、20.0 μg、40.0 μg、60.0 μg、80.0 μg和 100.0 μg 氮） ，分别置于 10 mL 比色管中。加 4.0 mL 乙酸钠-乙酸缓冲溶液及4.0 mL 显色剂，加水稀释至刻度，混匀。置于 100 ℃水浴中加热 15 min。取出用水冷却至室温后，移入 1 cm比色杯内，以零管为参比，于波长 400 nm处测量吸光度值，根据标准各点吸光度值绘制标准曲线或计算线性回归方程。 1.4.4试样测定 吸取 0.50 mL～2.00 mL（约相当于氮＜100 μg）试样溶液和同量的试剂空白溶液，分别于 10 mL 比色管中。以下按 1.4.3自“加 4 mL 乙酸钠-乙酸缓酸溶液（pH 4.8）及 4 mL 显色剂……”起操作。试样吸光度值与标准曲线比较定量或代入线性回归方程求出含量。 1.5结果计算 试样中蛋白质的含量按以下公式进行计算 式中： X ——试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（g/100g）； C ——试样测定液中氮的含量，单位为微克（μg）； C0 ——试剂空白测定液中氮的含量，单位为微克（μg）； V1 ——试样消化液定容体积，单位为毫升（mL）； V2 ——制备试样溶液的消化液体积，单位为毫升（mL）； V3 ——试样溶液总体积，单位为毫升（mL）； V4 ——测定用试样溶液体积，单位为毫升（mL）； m ——试样质量，单位为克（g）； F ——氮换算为蛋白质的系数。纯乳与纯乳制品为 6.38； 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，蛋白质含量≥1 g/100 g 时，结果保留三位有效数字；蛋白质含量＜1 g/100 g 时，结果保留两位有效数字。 2炼乳中乳糖含量的测定（GB 54135-2010 莱因―埃农氏法） 2.1原理 乳糖：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，直接滴定已标定过的费林氏液，根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 2.2试剂 乙酸铅溶液（200g/L） 草酸钾磷酸氢二钠溶液 费林氏液（甲液和乙液） 次甲基蓝溶液（10g/L） 2.3仪器 万分之一天平 加热套 2.4步骤 2.4.1费林氏液的标定 2.4.1.1 称取预先在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g（精确到0.1mg），用水溶解并定容至250mL。将此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 2.4.1.2 预滴定：吸取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中。加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL样液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的