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微生物学实验二 本周实验内容 下周实验内容 * * 实验二：7种微生物的接种与培养特征观察 细菌（大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、褐球固氮菌） 真菌（黑曲霉菌、黑根霉菌、啤酒酵母） 放线菌（链霉菌） 2支试管/菌; 2个平皿/菌; 需灭菌的物品 1000 ul 枪头 一盒/组 10 ul 枪头 一盒/组 Enpendorf 管 20个/组 高压灭菌，备用 灭完菌后，请收到各组的柜中放好，包装纸不要打开！ 高温干热灭菌 高压蒸汽灭菌 试管、瓶子、培养皿等 常用的灭菌方法： 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具： 紫外线灭菌 微孔滤膜过滤灭菌 化学试剂灭菌 高温干热灭菌 原理：利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性 原理：利用水蒸气使微生物细胞内的蛋白质凝固变性 高压蒸汽灭菌 又叫湿热灭菌 1.湿热中细菌吸收水分，蛋白质较易凝固； 2.湿热的穿透力比干热大； 3.湿热的蒸汽有潜热存在。 原理：紫外线诱导胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA的交联，从而抑制DNA的复制 紫外线灭菌 微孔滤膜过滤灭菌 原理：利用孔径小于细菌的滤膜（0.22 um）截留细菌 石炭酸消毒外科手术 化学试剂灭菌 2、接种操作 无菌操作： 火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行 移液器 接种环、玻璃涂棒 2、接种操作 无菌操作： 在无菌箱或操作室内无菌的环境下进行 生物安全柜 超净工作台 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 褐球固氮菌 划线接种 细菌 黑曲霉菌 啤酒酵母 黑根霉菌 放线菌（链霉菌） 真菌 三点接种， 并放置盖玻片 接种方法 Page 53 划线接种完后，做插片 Page 49 接种注意事项 1. 将需要接种操作的那一块桌面用75%酒精擦干净； 2. 尽量避免来回走动； 3. 接种在酒精灯火焰附近操作； 4. 接种时避免用力过大，划破培养基表面； 5. 接种针要及时烧灼灭菌，避免交叉污染； 6. 接种后的试管和平皿都还放回自己的柜子中，平皿要倒置放； 7. 盖玻片用烧灼过的镊子夹住，在酒精棉球上将两面擦一下进行消毒； 8. 带菌的培养基严禁倒入水槽中 实验三：7种微生物的培养特征观察 细菌的染色和显微观察 细菌（大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、褐球固氮菌） 真菌（黑曲霉菌、黑根霉菌、啤酒酵母） 放线菌（链霉菌） 请同学们课下提前预习！ 实验报告待下次实验做完，一起交。