EM-315---Nrf2基因过表达对百草枯诱导骨髓间充质干细胞损伤影响-卢中秋.pdfVIP

Nrf2 基因过表达对百草枯诱导的骨髓间充质干 细胞损伤的影响 1 蔡晓霞 ，陈燕珍，周挺，赵光举，邱俏檬，洪广亮，卢阳，卢中秋 【摘要】：目的 观察核因子 E2 相关因子 2 转录因子（nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2）基因过表达对百草枯（paraquat, PQ）诱导的骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs ）损伤的保护作用。 方法 实验分为 6 组：正常 BMSCs 组、 BMSCs-mCherry (红色荧光蛋白) 组 、BMSCs-Nrf2 组 、BMSCs+PQ 组 、BMSCs-mCherry+PQ 组 、 BMSCs-Nrf2+PQ 组，于 PQ 刺激 24 小时之后收集细胞及上清液。蛋白免疫印迹法（western blot） 检测胞核内 Nrf2 蛋白量；CCK-8 法检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；化学比色法检 测脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde, MDA）,过氧化氢酶酶 （catalase, CAT）的含量，酶 联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液白细胞介素（interleukin, IL）-6、IL-10 及肿瘤坏死因子 （tumor necrosis factor, TNF）- α的量。结果 与 BMSCs 组相比，BMSCs+PQ 组；BMSCs-mCherry+PQ 组；BMSCs-Nrf2+PQ 组细胞存活率、上清液中 CAT 、IL-10 的蛋白含量均降低，差异均有统计学意 义（P0.05）,而细胞核内 Nrf2 蛋白表达量、细胞凋亡数量、上清液中 MDA、IL-6、TNF- α的蛋白 含量则显著升高，差异均有统计学意义（P0.05）;与 BMSCs+PQ 组相比，BMSCs-Nrf2+PQ 组细胞核 内Nrf2 蛋白表达量、细胞存活率、上清液中 CAT、IL-10 的蛋白含量均上升，差异均有统计学意义 （P0.05）,而细胞凋亡比例、上清液中 MDA、IL-6、TNF- α 的蛋白含量则显著降低，差异均有统 计学意义（P0.05）。结论 Nrf2 基因可明显提高 BMSCs 细胞核内 Nrf2 蛋白的基础表达量表达，抵 抗 PQ 对 BMSCs 的损伤作用。 【关键词】 Nrf2 ； 百草枯； 骨髓间充质干细胞； 氧化应激 The effect of Nrf2 overexpression in bone marrow mesenchymal stem cells damage induced by paraquat. Cai Xiao-xia. Chen Yan-zhen, Zhou Ting, Zhao Guang-ju, Qiu Qiao -meng, Hong Guang-liang, LuYang, Lu Zhong-qiu * . *Emergency Department of the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, China 1 项目基金：浙江省医药卫生科技计划 （2012-ZD-A033 ），浙江省“十二五”重点学科建设计划资助，浙江省医学创新 学科计划（11-CX26 ），浙江省中医药重点学科计划（2012-XK-A28 ）， 作者单位： 温州 325000，温州医科大学附属第一医院急诊医学中心(蔡晓霞，赵光举，邱俏檬，洪广亮，卢阳，卢 中秋) 、义乌市中心医院（陈燕珍）、宁波市医疗中心李惠利医院（周挺） 通信作者：卢中秋，教授，主任医师，博士生导师，主要研究方向：危重病急救的基础与临床研究、急性中毒的毒 理及解毒研究 Corresponding author: LU Zhongqiu 【Abstract 】: Objective To observe the protective effect of nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2) overexpression in bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs) damage induced by par- aquat(PQ). Methods The experiment was divided into six groups: norm