shRNA沉默PLCε基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制.pdfVIP

·916· 肿瘤2008年11月第28卷第i1期Tumor Basic DOI：10．3781／j．issn．1000-7431．2008．11．1302 Research·基础研究 shRNA沉默PLCe基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制 谢建红，罗春丽，郭永灿，冀慧莹，吕纯芳，苟春华 (重庆医科大学检验系，临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室，重庆4)016) C [摘要】．目的：探讨经短发夹RNA(shorthalrpinRNA，sfiRNA)干扰技术沉默磷脂酶Ce(phospholipaseepsilon，PLCe)基因 h后采 染786-0细胞48h后，RT-PCR检测PLCemRNA的表达；Mr兀法检测转染24、48和72h后细胞增殖的抑制率；转染48 h后p27和Ki67的表达情况。结果：转染重组质粒后可 用FCM方法分析细胞周期；RT．PCR和免疫细胞化学法分析转染48 明显抑制PLCemRNA的表达，其抑制率为69．7％；转染24、48和72h后细胞增殖抑制率分别为21．2％，31．6％和32．7％； FCM结果显示转染重组质粒后细胞周期的分布发生了改变，c。／G。期细胞增多，s期和G2／M期细胞减少，细胞阻滞于G。／G。 术阻断PLCe基因表达后可抑制肾癌786-0细胞增殖，其作用机制可能是诱导p27表达上调和Ki67表达下调。 [关键词] 癌，肾细胞；基因沉默；磷脂酶C；细胞增殖 [中图分类号]R737．1l[文献标志码]A [文章编号]1000-7431(2008)11-0916-05 and The effectof PLCe shRNAonthe ofrenalcarcinomacells inhibitory gene silencing expressionby proliferation itsactionmechanism XIE ofMedical laboratory， Jian—hong，LUOChun—li，GUOYong-csn，JI Chun—fang，XUNChun—hua(Department Hui．ying，L0 ofClinical of Medical 400016， KeyLaboratory LaboratoryDiagnostics，MinistryEducation，ChongqingUniversity，Chongqing China) the effectofshort silenceof C [ABSTRACT]Objective：Toinvestigate hairpinRNA(shRNA)一mediatedphospholipase inhibitory onthe ofrenalcarcinoma786-0cellsanditsac