RNAi技术在肿瘤研究中的应用进展.pdfVIP

602 重庆医学2009年3月第38卷第5期 ·综 述· RNAi技术在肿瘤研究中的应用进展 李士敏1综述，吴丽美2审校 6) (1．重庆医药高等专科学校400030；2．重庆医科大学生物医学工程系40001 关键词：RNA；肿瘤；进展 中图分类号：R73 文献标识码：A 文章编号：167．1—8348(2009)05—0602—03 RNAi(RNAintcrference，RNAi)是由双链RNA(double stranded RNA，dsRNA)介导的序列特异性转录后基因沉默发现Hela细胞的增殖、侵袭和转移能力受抑，进一步研究其机 (post—transcriptionalgenesilcncing，PTGS)的过程，通过反义制发现CML66表达受抑后cathepsinL、MMPl5、uPAR、 链与正义链形成双链RNA，特异性地抑制靶基因的表达，即通 过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA(正义而推断出CMI。66作为致癌基凶通过多途径促进肿瘤的增殖、 RNA和反义RNA)，从而诱导内源靶基因的mRNA降解，达侵袭和转移。 到阻止基因表达的目的[1]。自198年Fire等首次提出后，2．2肿瘤侵袭与转移的研究恶性肿瘤的侵袭与转移是临床 上绝大多数肿瘤患者致死的原因，应用RNAi技术对肿瘤侵袭 RNAi成为研究的热点，在2002年E：Science评选的科学成就 中RNAi名列榜首。该技术应用广泛，在药物开发、信号转导与转移的发牛机制及有关基因的改变进行研究，有助于加深理 通路、基因治疗以及基因组的研究方面有重大的意义，同时也 解恶性肿瘤的生物学本质，为从不同水平阻断肿瘤的侵袭与转 在病毒感染、肿瘤、移植免疫等疾病的治疗上有研究应用。近 移提供理论依据和方法。肿瘤的侵袭和转移与肿瘤『llL管形成、 年来，RNAi技术在肿瘤的基础研究和治疗中取得了一螳进一些细胞黏附分子的分泌及肿瘤细胞的抗失巢凋亡有关。 展，现进行综述如下。 1 RNAi的分子机制 目前研究认为，RNAi可能的分子机制分为两个阶段『2】： Id3(InhibitorofDNA 1．1 起始阶段RNA病毒感染、转座子转录和外源导人基因 binding 表达等町使生物体细胞内出现dsRNA，dsRNA在具RNase样胞系MKN45，证实Idl、Id3的敲除显著抑制胃癌细胞腹膜转 endonucle— 活性的dsRNA特异件核酸内切酶(dsRNAapecific ase，Dicer)作用下，被裂解成由正义和反义链组成的2I～23ntMTAI基因的表达，从而下调ERa的表达，结果使这两株乳腺 的小干扰RNA(smallRNA，或short 癌细胞的侵袭活性下降。 interfering interfering RNAs，siRNA)。 2．3肿瘤信号传导通路的研究 由于肿瘤发生发展的原因尚 1．2效应阶段 目前认为该阶段存在两种假说模式，内源性 未十分明了，而各种致癌分子和抑癌分子间形成复杂的信号传 核苷酸裂解(endonucleolyticcleavage)模式和随机降解性多聚导通路网络系统，因此成为研究的热点。在肿瘤的发生发展过 程中，由于各种基因水平的变化，使某些通路处于异常激活状 酶链反应(randomedgradative，PCR)模式，二者的区别在于前 者siRNA作为向导序列，诱导无活性的沉默复合物(RNAin—态，另一些则传递受阻，但其机制尚待进一步阐明。由于 dueed silencingcomplex，RISC)前体活化，活性RISC再与同源RNAi具有高特异性的特点，可以特