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届高考生物一轮复习第讲微生物的培养与应用课件新人教版选修(湖南专用)..ppt
用酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 2.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 4.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 1.(2009·安徽)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 D 【解析】本题考查的是选修1专题2“微生物的培养与应用”的有关知识。确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,求其平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数 * 第1讲 微生物的培养与应用 一、微生物的培养与应用 1.微生物的实验室培养 (1)培养基 ①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②分类和应用 ③培养基配方及营养要素 基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 【友情提醒】①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 ②对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。 ③有些培养基不需要添加特殊营养物质,生物自己能合成,如大肠杆菌能合成某些维生素,作为特殊营养物质。 ④制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 无菌技术主要操作要求 a.实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。 b.实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 (2)无菌技术 2.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 ②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面;稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 (3)菌种的保藏 ①短期保存:固体斜面培养基上4 ℃保存,菌种易被污染或产生变异。 ②长期保存:-20 ℃甘油管在冷冻箱中保藏。 【友情提醒】平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 【例1】分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答: (1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是葡萄糖 和尿素。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的? 有选择作用。因为此配方中尿素是惟一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 (3)培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌及消毒方法依次是( A) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤ 【解析】碳源是
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