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亲和层析-酶联疫吸附法检测βamp;lt;,2amp;gt;-兴奋剂的研究.pdf
中文摘要
为24.21:1,包被抗原(CLoA)的偶联比率为13.63:1。
利用制备好的抗原免疫家兔,获得抗RI卫抗血清,抗CL抗血清,抗s砒血清,以制各相应
的多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附检测法(ELISA)对抗血清效价进行了检测,抗Rc诫血清,
异性较高和与各自抗原同系物的交叉反应率也很低。在优化包被抗原浓度。封闭条件,抗体和酶
标二抗的浓度,显色时间等条件的基础上,采用间接竞争EusA法建立检测RcT,CL,SAL的标
准曲线,三者分别在0.55
度范围之间,呈良好的线性相关,RCT、CL、SAL的最小检测极限0.55ng/mL、2.71ng/mL、
范围内。在间接竞争EusA方法的基础上,制备了RCT,CL,SAL间接竞争酶联免疫吸附检测技
术,可用于检测动物肌肉组织、尿液中RCT,eL,SAL的残留量。
为进一步降低检测限,在间接竟-争-ELISA的基础上,利用抗RCI抗体,抗CL航体,抗SAL抗
立了检测RcT,cL,s^I戮留的亲和层析柱一酶联免疫吸附衅c_EusA)检测技术。经优化后
队C-EUSA方法的检测限可降低一个数量级,达O.01ng/g。
关键词:莱克多巴胺,克伦特罗。沙丁胺醇,酶联免疫吸附检测法,免疫亲和层析
IIl
Abstract
Inthis were tocartier
Salbutamol(SADcoupled
study,Ractopamine(RCT),Clenbute:rol(CL)and
and themixed methodand
prepareimmunogencoatingantigenusing anhydride
protein(BSAOA)to
BSAwag andRcrtoOAwas to
diazotizedmethod.TheratioofRCTto 25.8:1 48.41:1,CL
coupling
BSAwas24.21:1andCLtoOAwas toBSAwas12.8:1andSALtoOAwas18.7:1.
13.63:1,SAL
andthe serumwereraisedinrabbits
啊1entheanti.RCTsenlm。theanti.CLserum anti-SAL
thetiterofanti-serumtheindirect
immunogens.Aftermonitoring by
respectivelyusingprepared
LinkedImmunoSorbent titerofthe anti-CL
Enzyme Assay(ELISA),thehighest anti-RCT《3rum,the
Serum of
setunlandtheanti-SALwere1:32000,1:16000,1:16000 three
mspectively.nespecificity
was andthfeekindsofanti—seromhadn’tcross-reactionwiththesimilar
kindsofanti-serum
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