《0670-0-耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达》.pdfVIP

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2016-01-25 发布于河南
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《0670-0-耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达》.pdf

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- - 2008 14 4 ): 534~538 2008 08 25 应用与环境生物学报， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2008.00534 耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达* 董晨曹娟张迹沈标** (南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095) 摘要高温 α- 淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类，为了实现高温 α- 淀粉酶基因的高效表达，本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温 α- 淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响. 分别用强启动子P 和地衣芽孢杆 43 菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBC19-amy，并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 1A752S中进行表达. 结果表明，与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子相比，采用P 启动子的耐 43 高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍. 而且在枯草芽孢杆菌B. subtilis 1A752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性，酶反应的最适温度为90 ℃，表明酶的热稳定性由蛋白质本身的氨基酸序列决定的. 图6 表1 参15 关键词耐高温α-淀粉酶基因；启动子P43；amy 启动子；高效表达 CLC TQ925.1 : Q786 * High-level Expression of Thermostable α-amylase in Bacillus subtilis ** DONG Chen, CAO Juan, ZHANG Ji SHEN Biao (Key Laboratory for Microbiological Engineering of Agricultural Environment, Ministry of Agriculture, College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China) Abstract Thermostable α-amylase is widely used in fermentation. In order to highly express thermostable α-amylase gene, the effect of promoters on the expression of thermostable α-amylase gene