《《紫杉醇与人血清白蛋白的相互作用-论文》》.pdf

第 53卷 第 4期 厦 门大学学报 (自然科学版) Vol_53 NO．4 2014年 7月 JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) Ju1．2014 紫杉醇与人血清 白蛋 白的相互作用 杨少梅 ，侯 瑾，黄志宁，李福 男 (厦门大学药学院，福建 厦门 361102) 捅 要 ：以人血清白蛋 白(HSA)为实验材料 ，通过荧光光谱 、等温滴定量热及紫外一可见吸收光谱等技术研究化疗药物紫 杉醇与其的结合机理．荧光光谱检测结果表 明：紫杉醇主要通过氢键和范德华力与 HSA结合 ，并引起其 内源荧光 的猝 灭．在温 』蔓为 303K下，二者间的结合常数为 lO．7×10。L／oto1．紫外一可见吸收光谱检测发现 ，随着紫杉醇浓度 的增加 ， HSA在 278nm处的吸收峰增大，证明二者结合后 HSA 的构象发生了改变．等温滴定量热实验则进一步说明二者的结 合是一个 自发进行的放热反应 ，在温度为 303K下结合常数为 8．8×10。L／mol，焓变、熵变及吉布斯 自由能分别为一 99．1kJ／mol，一183．6J／(mol·K)和一43．5kJ／oto1．本研究为紫杉醇在血液 中的运输及传递提供理论支持． 关键词 ：人血清 白蛋白(HAS)；紫杉醇；荧光光谱；紫外一可见吸收光谱 ；等温滴定量热仪 中图分类号：R961 文献标志码 ：A 文章编号 ：0438—0479(2014)04—0581—07 紫杉醇 (Paclitaxe1)又名泰素 ，最早 由MonroeE 的热力学特征与配体一蛋 白复合物 的结构生物学特征 Wal1和 MansukhCWani从太平洋红豆杉 (Taxus— 相结合，深入揭示配体一受体的结合本质 ，对开发安全 brevifolia)的树皮中分离得到，并命名为紫杉醇口]．紫 高效的抗肿瘤药物作用提供分子机制的理论支持． 杉醇具有独特 的作用机制 ，研究报道指 出其能诱导与 促进微管蛋 白聚合 、微管装配与微管稳定，抑制细胞 1 实验部分 有丝分裂 ，从而阻止肿瘤细胞 的生长[2]．临床数据表 明，紫杉醇对乳腺癌 、卵巢癌 、肺癌等有 良好的疗效．对 1．1 仪器与试剂 其药物机理的研究一直是该药的研究热点之一Ⅲ3]． Caryeclipse型荧光分光光度计 (Varian，USA)， 人血清 白蛋 白(HSA)是血浆中含量最丰富 的重 Cary50一bio型紫外一可见分光光度计 (Varian，Aus— 要载体蛋 白，具有储运 内源性代谢产物和外源性药物 tralia)，ITC200型等温滴定量热仪 (GE，USA)，ICM 小分子 (离子)等重要生理功能，参与许多重要 的生命 3．3-04a(Molsoft，USA)，Millipore超纯水系统 (Milli— 过程_l4]．药物进入血液后 ，先和HSA结合成复合物 (可 pore)．紫杉醇 (Sigma，USA)，HSA (Sigma，USA)． 逆)，然后再被运输 到机体 的各个部位进行释放．因此 1．2 方 法 研究HSA与药物的结合具有多重 的理论和现实意义． 本研 究采用等温滴定量 热法对 紫杉醇分子与 1．2．1 荧光光谱实验 HSA间的相互作用进行了研究，对传统 的光谱学研究 实验从 3个温度 (293，303和 310K)考察紫杉醇 是一种补充 ，同时也取得了一些有意义的结果．测定物 对 HSA的荧光猝灭．HSA 浓度