第5章农药残留测定方法.pptVIP

分离系统——色谱仪的核心部分 保护柱起到保护分析柱作用，固体微粒、污染物首先被保护住挡住。 检测系统 将物理或化学特性转变为可处理的电信号 控制和数据处理系统 由计算机和数据处理软件组成 HPLC常用检测器 紫外-可见光检测器（UV-VIS） 浓度型的选择性检测器 液相色谱应用最广泛的检测器 具有紫外吸收能力的物质 缺点：对紫外无吸收的物质无响应，对紫外有吸收的溶剂（如苯）不能用作流动相。 紫外-可见光检测器（UV-VIS） 光源：氘灯（紫外光源）195~400nm 钨灯（可见光源）400~850nm 透镜：将光源射来的光束变为平行光 遮光板：将平行光变为细小平行光束 测量池：通流动相+检测样品 参比池：通参比品（多为空气） 滤光片：滤去非单色光 光电倍增管：接收信号 5.3 薄层色谱法 薄层色谱法（Thin-Layer Chromatography, TLC） TLC是在平面上进行分离的一种方法，又叫平面色谱法，采用液体作为流动相，属于液相色谱的范畴。 按其固定相的性质和分离机理可分为： 吸附薄层法 分配薄层法 离子交换薄层法 凝胶薄层法 应用较为广泛 吸附薄层法的原理 将吸附剂（固定相）均匀地涂布在玻璃、金属等载板上形成薄层，在薄层的一端点上试样溶液，置于展开室中，将薄层的下端浸入合适的展开剂（流动相），借毛细作用使溶剂上升。试样组分不断地被吸附剂吸附，又被溶剂溶解解吸，随展开剂向前移动，由于吸附剂对不同组分有不同的吸附能力，展开剂也有不同的解吸能力，因此在流动相向前移动的过程中，不同组分移动的距离不同，从而得到分离。 薄层分离是被分离物质（样品）、吸附剂（固定相）及展开剂（流动相）共同作用的结果。 薄层板的制备 玻璃板需光洁，否则吸附剂易脱落，大小由需求决定。 软板：吸附剂直接干法涂层 硬板：吸附剂加黏合剂后湿法涂层 吸附剂（固定相）：90%以上的分离都可应用硅胶 常用黏合剂：煅石膏（CaSO4·1/2H2O） 机械强度差，易脱落，但不易腐蚀 羧甲基纤维素钠（CMC-Na） 机械强度好，不易脱落，但易腐蚀 点样 在薄层色谱技术中，点样是造成定量误差的主要来源。 样品溶液的制备：将样品中的残留农药定量地提取出来，配制成一定浓度的样品溶液，常用溶剂为甲醇及乙醇。点样后必须将溶剂全部除去后再进行展开。 点样技术 点状点样和带状点样，点样体积和点样量不宜过大，否则容易造成远点“超载”，展开剂产生“绕行”现象，使斑点拖尾或重叠。点样基线距底边2.0cm，样点直径2~4mm，点间距离1.5~2.0cm 展开 点样后的薄层需置密闭并加有展开剂的展开室中进行展开。 展开剂渗过薄层板的固定相，借毛细管作用力的影响，样品与展开剂及固定相之间相互作用，使样品中各成分沿展开剂流动的方向分开。 定性分析 斑点的比移值（Rf） 比移值是溶质移动距离与流动相移动距离之比，是薄层色谱的基本定性参数。 根据图中所给数据，分别计算物质A 和物质B的Rf值。 Rf =0， Rf =1分别表示？ 定量分析 间接定量（洗脱测定法） 取下斑点→用溶剂洗脱化合物→收集洗脱液→分析测定。 直接定量（原位薄层扫描法） 用薄层色谱扫描仪（或薄层色谱光密度计）对薄层上被分离物质进行直接定量的方法。 基本测定原理：用一束具有一定波长和强度的光照射到薄层斑点上进行整个斑点的扫描，用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的变化从而达到定量的目的。 5.4 色谱-质谱联用技术 质谱：化合物分子经电离后，形成具有不同质荷比（m/z）的离子，在质量分析器的作用下按照其m/z大小分开，到检测器被检测记录下来而形成的谱图。 真空系统 质谱仪的基本结构 质谱（MS） 进样系统：气相色谱（GC）、高效液相色谱（HPLC）和直接进样都可以作为MS的进样系统。 离子源：使气态分子电离成离子的装置，MS的心脏。 质量分析器：将经过电离加速的离子束按不同m/z分离，MS的分离系统。 离子检测器：离子源产生的离子经过质量分析器被分离后到达接收检测系统。 采用质谱法对农药进行分析，通常可以提供如下信息：该农药的相对分子量、分子式、分子结构。 GC-MS GC-MS综合了GC的高分离效能和MS的高鉴定能力，是当前分离鉴定混合物的最有效手段。 GC-MS的基本构造 LC-MS LC-MS适用于热不稳定、难挥发等农药残留的快速定性和定量分析。 LC-MS的基本构造 LC的最佳分离条件的选择往往受MS的限制，LC-MS接口标准化问题还未解决。 * 第五章 农药残留测定方法 5.1 气相色谱法 （1）气相色谱法基本术语 色谱图：响应信号—时间or响应信号—载气流出体积 基线：仅载气通过时检测器所产生的响应信号曲线 色谱峰：色谱柱流出组分通过检测器时所产生的响