RAC_OVA抗原和抗RAC单克隆抗体的筛选.docVIP

现代食品科技  Modern Food Science and Technology  2011, Vol.27, No.12 RAC-OVA 抗原和抗 RAC 单克隆抗体的筛选 李伟汉，何小维，齐维，陈富裕 （华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640） 摘要：在进行酶联免疫反应实验操作过程中，为了保证材料质量及使用的延续性，在使用前分别对两对抗原抗体进行了筛选和 评价。主要是从抗体灵敏度的测定、抗体特异性的测定和抗体效价的测定这三个方面来选择灵敏度好、特异性强和效价高的一对抗原 抗体。其中抗体灵敏度的测定中，单位 1（江南大学）的抗体 IC50的平均值为 3.22 μg/L，灵敏度较好；两家单位的莱克多巴胺单克隆 抗体的特异性都较好；单位 1 的抗体效价为 1:32000，效价较高。最终选择江南大学提供的 RAC-OVA 抗原，原始浓度为 10 mg/mL， 抗莱克多巴胺单克隆抗体的原始浓度为 9.8 mg/mL。 关键词：酶联免疫反应；灵敏度；特异性；效价；抗莱克多巴胺单克隆抗体 文章篇号：1673-9078(2011)12-1480-1483 Selection of RAC-OVA Antigen and Monoclonal anti-RAC antibody LI Wei-han, HE Xiao-wei, QI Wei, CHEN Fu-yu （College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China） Abstract: During the ELISA experimental operation process, two pairs of antigen and antibody with a good sensitivity，strong specificity and high titer were screened and evaluated respectively before used in order to ensure quality of materials and use of continuity. Determination of antibody sensitivity (antibody made by Jiangnan University) showed an average of IC50 being 3.22 μg/L with high sensitivity. Ractopamine monoclonal antibodies of two units were both good. Antibody titer of the antibody made by Jiangnan University was 1:32000，which was better than the other. The RAC-OVA antigen made by Jiangnan university was used with original concentration 10 mg/mL. The original concentration of the Monoclonal antibody anti-RAC was 9.8 mg/mL. Key words: ELISA; sensitivity; specificity; titer; Monoclonal antibody anti-RAC 莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）是一种苯酚胺 类 β-肾上腺素兴奋剂，分子式 C18H23NO3，分子量 301.39[1]。市场销售的莱克多巴胺为其盐酸盐，是 RS、 SR、RR、SS 四种异构体的混合物，Ricke 等的研究 表明异构体 RR 是莱克多巴胺主要的生物活性异构体 [2] 是一种营养再分配剂，对体内代谢的作用较强，能降 低脂肪生成、促进脂肪分解、促进蛋白质合成并减少 其降解，还能促进胰岛素的释放，使糖原分解增加， 因此能利用合成脂肪的能量和成分来增加蛋白质的合 成。由于莱克多巴胺具有营养再分配作用，可明显提 高瘦肉率，经济回报率高，作为一种新型饲料添加剂 而在畜牧生产中应用[3]，很多经营商和养殖户普遍使 用。但它与盐酸克伦特罗一样，属于违禁药物，而且 由于用作生长促进剂的剂量是治疗剂量的 5~10 倍， 易在动物组织，特别是内脏中积聚残留，并通过食物 收稿日期：2011-09-21 基金项目：广东省科技攻关项目（2009B020312006） 作者简介：李伟汉（1986-），男，研