miR-372对胃部细胞的影响及其作用机制的研究.pdf

摘 要 胃癌是一种很常见的癌症，在中国是死亡率较高的癌症之一。在 所有男性和女性恶性肿瘤中，胃癌发病率分别列第4、第5。我国每 年约有30万人死于胃癌，另有约40万新发病例。尽管手术联合放 疗等先进技术的应用于胃癌的治疗，但是仍然没有一种方法能彻底治 疗胃癌。这主要是由于没有对胃癌的发病机制有一个很清楚的了解。 近期研究发现多种miRNAs在胃癌表达异常并直接参与调控其 发生和发展。例如：miR．106a在胃癌组织中的表达量明显更高，并 且与胃癌的肿瘤大小、分期、腹腔和远处淋巴结转移直接相关，提示 miR一106a可能具有促进胃癌进展的作用。Let．7microRNA家族成员 在胃癌组织呈低表达，其具有负调控HMGA2基因的作用，而高表 达的HMGA2蛋白在胃癌组织，肿瘤更容易向浆膜外侵袭，患者预 后更差。这些研究证据揭示了miRNAs可能通过各种不同的方式和途 径对胃癌的癌变过程起促进或者抑制作用，进而影响其生物学行为。 本实验中，通过对15对临床胃腺癌标本的分析发现，miR-372在胃 腺癌组织中的表达量普遍高于癌旁组织。在两种胃癌细胞(AGS和 AGS细胞系中高表达，这提示miR-372的表达可能与癌症类型或起 源有关。通过Hoechst33258染色方法和流式细胞分析细胞凋亡、 Western 达miR．372发现可以促进细胞增殖。通过荧光素酶活性以及突变分析 实验、Westemblot实验分别抑制或过表达AGS细胞和HGC．27细胞 中的miR．372，从“正和“反’’两方面实验证明miR-372可以直接抑制 促炎症因子肿瘤坏死因子仅(TNF．0【)、白介素6(IL6)诱导的蛋白。 在HeLa细胞中发现过表达TNFAIPl可以诱导细胞凋亡，大鼠的实验 作用，也可以在PCNA存在的条件下激活DNA聚合酶的活性， 中扮演了重要的角色。另一方面，运用真核表达质粒 8和PARP也被激活，这些影响与在胃癌细胞 的凋亡，同时Caspase 中干扰miR-372所引起的效果一致。 细胞的增殖和凋亡，这体现了miR-372在胃癌细胞中具有基因的特 征，同时这将有可能为一种通过小分子RNA信号途径导致胃癌产生 的重要分子机制提供新的证明，并最终对揭示癌症的复杂调控分子机 制，为将来基因诊断并最终利用分子干预手段治疗胃癌及其相关疾病 提供理论依据。 关键词：胃癌细胞，microRNA．372，TNFAIPl，NFv,_B II ABSTRACT Gastric its oneofusualcancerin cancer，with highmortality,is China．Inallmaleandfemale cancer malignanttumors，stomach incidencerankinforthorfifth．In areabout300 China，there thousand diedfrom cancerandanother400thousandnewcases． people gastric Even advanced hadbeenusedin though，manytherapies treatingit，cure canceris is becausewehaven’ta gastric problem．Itmainly good commandofmechanismof cancer gastric