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RNA干扰YAP基因对人膀胱癌T24细胞株增殖和迁移能力的影响.pdf
中国癌症杂志 2014年第24卷第6期 《 》 406 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.6 RNA干扰YAP基因对人膀胱癌T24 细胞株增殖和迁移能力的影响 胡光辉 徐亮 赖鹏 郭锥锋 刘欢 刘敏 王云 姚旭东 许云飞 上海市第十人 民医院泌尿外科 ,同济大学附属第十人 民医院 ,上海 200072 [摘要] 背景与目的:膀胱尿路上皮癌是泌尿统系最常见的肿瘤,术后易复发及转移,Yes相关蛋白 (Yes associated protein,YAP)基因与膀胱癌关系密切,本研究探讨通过RNA干扰技术沉默膀胱癌T24细胞中 YAP基因的表达,观察YAP基因沉默后对人膀胱癌T24细胞增殖、迁移能力的影响。方法:用阳离子脂质体转染 试剂LipofectamineTM2000将靶向沉默YAP基因的小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)序列转染至膀胱 癌T24细胞株中,采用实时定量逆转录聚合酶链反应 (quantitative real time-polymerase chain reaction, qRT-PCR)、蛋白质印迹法 (Western blot)检测转染后T24细胞中YAP基因及蛋白的表达水平,细胞增殖活性检 测试剂盒 (cell counting kit-8,CCK-8)、Transwell迁移试验以及划痕实验观察siRNA在体外对人膀胱癌T24 细胞增殖、迁移能力的影响。结果:转染siRNA后,YAP RNA和蛋白表达量同空白对照以及阴性对照组相比被显 F P F P 著抑制 (RNA: 93.91, <0.000 1;蛋白: 4.62, <0.05),CCK-8增殖活性实验结果显示,RNAi干扰YAP F P F P 表达可以显著抑制膀胱癌T24细胞的增殖活性 (12 h: 6.00, 0.037;24 h: 41.72, 0.000 3;36 h: F P F P F P 462.8, <0.000 1;48 h: 236.6, <0.000 1;72 h: 140.5, <0.000 1),通过Transwell实验和划 F P 痕试验发现,RNAi干扰YAP表达显著抑制膀胱癌T24细胞的迁移能力 (Transwell: 43.55, <0.05;划痕: F P YAP 43.55, <0.05)。结论: 基因是膀胱肿瘤增殖及迁移的重要调控因子。 [关键词] 膀胱癌;Yes相关蛋白;RNA干扰技术;细胞增殖;细胞迁移 DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2014.06.002 中图分类号:R737.14 文献标志码:A 文章编号:1007-3639(2014)06-0406-06 Inhibition of YAP gene
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