抗体分析.pdfVIP

( ) 福建农林大学学报 自然科学版 第 39卷 第 3期 Jou rnal of Fuj ian A gricu ltu re and Forestry U n iversity (N atu ral Science Edition) 20 10年 5月 猪圆环病毒 Ⅱ型血清抗体 EL ISA 检测方法的建立 1 2 1 1 1 2 1 1 1 车勇良 , 石运通 , 陈少莺 , 王隆柏 , 魏 　宏 , 吴振糜 , 庄向生 , 陈如敬 , 周伦江 ( 1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 /福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 , 福建 福州 3500 13; 2. 福建农林大学动物科学学院 ,福建 福州 350002) ( ) 摘要 : 为了检测猪圆环病毒 Ⅱ型 PCV2 抗体 ,本试验建立了快速 、敏感的 EL ISA 诊断方法. 通过比较差速离心 、蔗糖不连续 梯度离心 、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等 4 种方法纯化 PCV2 抗原的包被效果 ,来确定最佳的 PCV2 包被抗原纯化方法 ,在此基础上 ,通过全病毒抗原最适包被浓度和二抗 HRPSPA 稀释倍数的确定 、待测血清稀释倍数的确 定 、封闭液浓度的确定 、封闭时间的确定 、HRPSPA 反应时间的确定 、临界值的确定 、特异性测定 、重复性测定 、符合率比较 等 ,进一步优化检测 PCV2抗体的间接 EL ISA 方法. 结果表明:对猪的多种病毒阳性血清进行 EL ISA 检测 ,只有 PCV2 阳性 血清呈阳性 ;对 6份血清进行 4 次重复试验 ,方差分析显示 P 0. 05,差异不显著 ;与 PCV2 EL ISA 试剂盒 ( IN GEZ MI 公司生 ) 产 的符合率比较 ,其总符合率达 88. 89%. 可见 ,优化建立的检测 PCV2 抗体的间接 EL ISA 方法特异性强 、重复性高 、稳定 性好 ,可用于 PCV2血清学诊断和血清学普查. 关键词 : 猪圆环病毒 Ⅱ型 ; EL ISA 方法 ; 抗体 中图分类号 : S858. 282 文献标识码 : A 文章编号 : 167 15470 (20 10) E stab lishm en t of EL ISA m ethod to detect porc in e c ircov iru s 2 an tibody 1 2 1 1 1 CH E Yongliang , SH I Yuntong , CHEN Shaoying , WAN G Longbai , W E I Hong , 2 1 1 1 WU Zhenm i , ZHUAN G X iangsheng , CH EN Ruj ing , ZHOU Lunj