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大蒜A病毒CP基因的原核表达及抗血清制备.pdf
生物技术通报
-研究报告· BIoTEcHNoLoGYBULLETlN 2011年第7期
大蒜A病毒CP基因的原核表达及抗血清制备
杨宇1 韦传宝1’2 华俊雅1 刘春云1 吴琪瑶3
摘 要：
均为98％。将Gary-ACP基因插入表达载体pSBET，在大肠杆茵BL2l(DE3)Plys
和5％一20％SDS．PAGE两次纯化，免疫小鼠获得抗CP血清，Westernblotting分析表明确定制备的抗体时CP具有高度特异
性，ELISA检测表明制备的抗体能够与天然病毒离子结合，因此可以作为该病毒的检测。
关键词： 大蒜A病毒CP基因原核表达抗血清制备
A
Prokaryotic ofGarlicvirusCPGeneand
Expression
ItsAntiserum
of
Preparation
YulWeiChuanba01·2Hua Liu Wu
Yang Junyal ChunyunlQiya03
andPharmaceutical Anhui 237012；
(1Biological EngineeringCollege，WestUniverdty，Liuan
2AnhaiProvincial BiomimerticSensorand
Laboratoryof DetectingTechnology，luuan237012；
3／#e＆如眦College，AnhuiUnioerslty，日咖230039)
wfl8 to GarlicvirusALiuanisolate．The showsthatGarV·Ashared
Abstract： designed multiplealigment
Specificprimer amplify
98％一99％nucleotideacidsidentitiesand98％aminoacidsidentitieswiththetwo ofCP onGenBank．Then
reported
sequencesgenes
theCP wa8insertedinto and inEscherichiacoli Estrain．The was
gene pSBETexpressed BL21(DE3)plysobjectproteinpurifiedby
theCPWasraisedinmouseandits
12％SDSand SDS．Theantiserum
fireflysubsequently5％一20％gradient against
issuitablefor detection。
wDJ5confirmedWestern resultindicatedthattheantiserum GarV·A
specificity by blottinganal
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