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7第七章 微生物的遗传变异和育种
几个概念 遗传(heredity) 变异(variation) 遗传型(genotype) 表型(phenotype) 饰变(modification) (一)转化实验 实验材料:肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae) Streptococcus pneumoniae 的几种形态 S型和R型 结 论 核酸是负载遗传信息的真正物质基础 二、遗传物质在细胞中的存在方式 2.特点 超螺旋结构; 携带某些特殊功能的基因(核基因组上所缺少),如具有接合、产毒、抗药、固氮或降解环境毒物功能的基因; 某些质粒可与核染色体发生整合或脱离 — 附加体; 当用一些理化因素处理时,可使子代细胞中的质粒消除,如丫啶类染料、丝裂霉素、紫外线或高温等因素; 具有重组的功能 — 质粒与质粒间、质粒与染色体之间; 有些质粒不表现任何功能 — 隐蔽性质粒; (三)突变率 每一个细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率; 自发突变几率 一般在10-6~10-9范围内; 突变率为10-8的含义:该细胞在一亿次分裂过程中,会发生一次突变。 抗性突变是最常见的突变类型; 细菌产生抗药性的途径 基因突变 抗药性质粒的转移 生理适应 两种观点: 突变的性状与引起突变的因素间呈对应性 — 抗性突变株的产生是由环境因素诱发出来的,属定向变异; 突变是自发产生的,与环境是否存在该物质无关,仅仅是一种用于筛选的环境而已。 1.变量试验(fluctuation test) 实验设计者 美国的鲁里亚和德尔波留克根据统计学原理设计; 时间:1943年 实验材料: 对T1噬菌体敏感的大肠杆菌 实验目的 验证突变的性状与引起突变的原因间有无直接对应关系 实验过程 2.涂布试验(Newcombe experiment) 实验设计者 1949年纽康布 实验材料 对T1噬菌体敏感的大肠杆菌 采用固体平板培养 实验过程 3.平板影印试验(replica plating) 实验设计者 1952年,美国的莱德伯格夫妇 实验材料 E.coli K12 实验过程 (四)突变的特点 不对应性 自发性 稀有性 独立性 诱变性 稳定性 可逆性 (五)基因突变及其机制 诱变剂:凡能显著提高突变频率的理化因子; 1)碱基置换 转换(transition) 嘌呤被嘌呤所置换或嘧啶被嘧啶所置换 颠换(transversion) 嘌呤被嘧啶所置换或嘧啶被嘌呤所置换 间接引起置换的诱变剂: 通过活细胞的代谢活动掺入到DNA分子中后引起的变化。如:碱基类似物; 3)染色体畸变 某些强烈理化因子,如电离辐射(X射线等)和烷化剂、亚硝酸等引起DNA分子的大片段损伤; 染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和倒位; 染色体数目的变化; b、抗药性突变株的筛选 C、营养缺陷型突变株的筛选 (1)与筛选营养缺陷型有关的三类培养基 基本培养基(minimal midium,MM) — [-] 完全培养基(complete medium,CM) — [+] 补充培养基(supplemental medium,SM) —[A] (2)与营养缺陷型突变有关的菌体 野生型 (wild type) — 能在[-]中生长 营养缺陷型 (auxotroph)— 能在[+]或[A]生长 原养型 (prototroph)— 能在[-]中生长 作为研究代谢途径和基因重组等遗传规律的标记菌种; 作为氨基酸、维生素或碱基等物质生物测定的试验菌种; 用作发酵生产核苷酸、氨基酸等代谢产物的生产菌株;; Ames test(艾姆氏实验)测定潜在化学治癌物 理论依据 一切生物的遗传物质基础都是核酸尤其是DNA,所以任何能改变核酸结构的因素都可引起核酸生物学功能的改变。 生物化学统一性法则 生物的“三致”(致突变、致畸变、致癌变)物质可引起核酸结构的改变,从而引起其功能的改变;反之亦然。 基本原理 Salmonella typhimurium 的his-菌株在[-]的平板上不能生长,如发生回复突变,则能生长。 试验步骤: 可疑“三致”试样 + 鼠肝匀浆 基因重组的定义 两个独立基因组内的遗传基因,通过一定的途径转移到一起,形成新的稳定基因组的过程称为基因重组或遗传重组,简称重组。 重组和杂交的关系 重组是在核酸分子水平上的杂交,与细胞水平上的杂交有明显区别 杂交中必然包含着重组,而重组则不限于杂交一种形式。 一、原核生物的基因重组 (一)转化(transformation) 1. 定义: 受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象。形成的杂种后代称为转化子。 2. 能进行转化的微生物种类 Streptococcus pneumoniae ;Baci
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