湛江博康海洋生物有限公司细菌内毒素工作标准品检验操作规程.docVIP

部 门 质量控制部 题 目 细菌内毒素工作标准品检验操作规程 起 草 审 阅 批 准 编 号 HY/02-ZK-203 执行日期 页 码 共2页 第1页 细菌内毒素工作标准品检验操作规程 一、范围：本标准规定了细菌内毒素工作标准品的测定方法和操作要求； 适用于本公司细菌内毒素工作标准品、细菌内毒素质控品的质检测定。 二、引用标准：2010年版《中国药典》附录“细菌内毒素检查法” 三、要求：1、操作环境：温度不得高于26℃，湿度不得高于75%； 2、标准品：细菌内毒素国家标准品。 五、操作步骤： 3．效价测定 以国家标准品为基准，随机取本品2支，使用同一批鲎试剂参考品测定，2支反应终点的均值应与国家标准品的效价相平行或一致。 3.1 凝胶法 3.1.1 根据鲎试剂灵敏度的标示值（λ），将细菌内毒素国家标准品用检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制备成4个浓度的标准内毒素溶液，即2λ、λ、0.5λ和0.25λ备用,每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。 3.1.2 设待复核的细菌内毒素工作标准品效价为P，用1ml检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制备成6个浓度的内毒素溶液，即（P/4λ）倍、（P/2λ）倍、（P/λ）倍、（2P/λ）倍、（4P/λ）倍和（8P/λ）倍备用,每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。 3.1.3 细菌内毒素国家标准品和细菌内毒素工作标准品稀释须同时进行。 3.1.4 按《细菌内毒素检查法》项下操作，每一个内毒素浓度平行做4管。如细菌内毒素国家标准品和细菌内毒素工作标准品的最大浓度4管均为阳性，最低浓度4管均为阴性，按下式计算细菌内毒素国家标准品反应终点浓度的几何平均值（E）和细菌内毒素工作标准品反应终点浓度对应的稀释倍数的几何平均值（D）。 其中E=1g-1(∑X/4) 式中 X为细菌内毒素国家标准品反应终点浓度的对数值（1g）； D=1g-1(∑X1/4) 式中 X1为细菌内毒素工作标准品反应终点浓度对应的稀释倍数的对数值（1g）。 则待复核细菌内毒素工作标准品的效价的测定值为PcC=E×D。 3.3 效价的确定 计算多次试验结果的几何平均值，记为标准品的标识值P，计算结果有小数位时取整数部分。 六、质量记录： 1 《细菌内毒素工作标准品检验原始记录》 HY/02-ZK-203-01 湛江博康海洋生物有限公司 记录编号：HY/02-ZK-203-01 细菌内毒素工作品效价标定记录 检验操作规程编号：HY/02-ZK-202 日期： 室温： 湿度： 试剂名称 生产单位 批号 效价/灵敏度 细菌内毒素国家标准品 中国药品生物制品检定所 待检细菌内毒素工作品 湛江博康海洋生物有限公司 鲎试剂 湛江博康海洋生物有限公司 细菌内毒素检查用水 湛江博康海洋生物有限公司 实验操作 细菌内毒素国家标准品： 待检品： 仪器： 保温时间： 保温温度： 内毒素浓度EU/ml 阴性对照 Log-1(∑X/4) 国家标准品 待检品稀释倍数 阴性对照 Log-1(∑D/4) 待检品效价 检验人员 校对人员