《生物科高考实验部分主干知识精选》【更多资料关注微博高中学习资料库】.docVIP

2015届《生物科高考实验部分主干知识精选》 4—1分子与细胞（实验） 1．观察DNA、RNA在细胞中的分布 原理：① 甲基绿能把DNA染成绿色，吡罗红使RNA染上红色； ② 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，以利于染色。 步骤 器材与试剂 作用与原理 ⑴ 制片 ① 将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9% 的NaCl溶液滴 ② 载玻片烘干 0.9% 的NaCl溶液：防止细胞破裂，维持细胞形态。 烘干：使细胞固定在载玻片上 ⑵ 水解 8% HCl中30℃保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于染色。 ⑶ 冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟 洗去浮色 ⑷ 染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色 吡罗红使RNA染上红色 ⑸ 观察 显微镜下观察：先低倍镜后高倍镜 实验结果 细胞核区域染成绿色，细胞质区域染成红色 实验结论 说明：DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中 对比 DNA + 二苯胺 → （沸水浴加热） 蓝色 2．1 可溶性还原糖的鉴定 1、什么是还原性糖： 还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。 非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。 2、还原性糖 + 斐林试剂（班氏试剂）→ （水浴加热）砖红色沉淀 （实质：还原性糖将Cu(OH)2还原为砖红色的Cu2O） 步骤 操作方法 ⑴选材 含还原糖较高的植物材料； 材料颜色白色或近于白色（目的是避免遮掩实验本身产生的颜色） ⑵制备组织液 制浆→过滤→取液 ⑶呈色反应 ① 加入组织样液2ml ② 加入刚配好的斐林试剂1ml ③ 50-60℃温水浴加热2分钟 结果：颜色变化 斐林试剂的甲液（0.1g/mL的氢氧化钠）和乙液（0.05g/mL的硫酸铜）等量混合均匀后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀，Cu(OH)2与还原糖在加热条件下，先变棕色，最后生成砖红色Cu2O沉淀。 2．2 脂肪的鉴定 1、脂肪 + 苏丹Ⅲ → （2-3分钟） 橘黄色 2、脂肪 + 苏丹Ⅳ → （1分钟）红色 步骤 操作方法 方法一 花生子叶匀浆 + 3滴苏丹Ⅳ→ （2-3分钟） 红色 方法二 （1）取材 花生种子浸泡，切成薄片 （2）制片 取最薄的切片，滴加2滴苏丹Ⅲ，1-2滴50%酒精去浮色，制成临时装片。 （3）观察 显微镜下观察被染成橘黄色的脂肪颗粒 2．3 蛋白质的鉴定 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色反应 （ 双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境下能与铜离子作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应 ） 步骤 操作方法 （1）取材 鲜肝提取液或豆浆、牛奶（或蛋清） （2）呈色反应 ① 样液中县加双缩脲试剂A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）2ml。先加A液目的是创设一个碱性环境。 ② 加双缩脲试剂B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）3~4滴。B液不能过量，原因是：过量会与Cu(OH)2反应生成蓝色，遮掩反应本身的颜色。 结果：颜色变化 出现紫色反应 3．用显微镜观察多种多样的细胞 目镜安装在镜筒上端，也叫接目镜。在目镜上方刻有5×、10×、20×等为放大倍数。从外表上看，镜头越长放大倍数越低。 物镜安装在转换器上，物镜上所刻8×、10×、40×等就是放大倍数，习惯上把10－20倍的叫做低倍物镜；40－60倍的叫做高倍物镜；90－100倍的叫做油镜。从形态上看，接物镜越长，放大倍数越高。 放大倍数计算方法为接目镜放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。 成像 显微镜成的是倒像，即“b” 在显微镜下看到的是“q” 低倍镜的使用 1、对光 2、标本放在载物台上，正对通光孔 3、转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降，直至物镜接近盖玻片 4、左眼看目镜内，反向转动粗准焦螺旋升高镜筒，直到看到物像 5、调节细准焦螺旋使物像清晰。 高倍镜的使用 1、低倍镜下看清物像 2、移动玻片，使所需观察的部分移至视野中央 3、转动转换器，使高倍镜对准通光孔 4、调节细准焦螺旋使物像清晰 5、调节光圈。 对比 视野范围 物镜与玻片间距离 视野亮度 清晰度 物像大小 低倍镜 大 大 亮 低 小 高倍镜 小 小 暗 高 大 4．观察线粒体和叶绿体 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可使活细胞中的线粒体染成蓝绿色 步骤 操作方法 目的与作用 （1）取材 ① 新鲜的藓类的叶 ② 菠菜叶下表皮略带一些叶肉 ①藓类叶为单层细胞 ②下表皮容易撕取,要略带些叶肉 （2