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三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh2和人参皂甙Rg3 陈业高1,黄　荣2,桂世鸿1,吕瑜平1,文　净1 (1.云南师范大学化学系,云南昆明　650091;2.云南大学实验中心,云南昆明　650011) 收稿日期:2003-11-9;修回日期:2003-05-06 基金项目:云南省教育厅科学研究基金项目(0111245) 联系人简介:陈业高(1965-),男,教授,主要研究药用植物活性、结构及活性成分分离。Email:Ygchen48@ 关键词:三七叶甙;水解;20(R)-人参皂甙-Rh2;人参皂甙Rg3;20(S)-人参皂甙Rg3 中图分类号:O629·9　　文献标识码:A 　　人参皂甙-Rh2(ginsenoside Rh2)和Rg3是从人参中分离得到的具有抗癌活性的四环三萜类原人参二醇型低糖链皂甙单体[1,2]。其中,以人参皂甙为主要成分的抗癌新药Rg3参一胶囊已获国家药品监督管理局颁发的中药一类新药证书。皂甙类成分要从植物中分离困难。为了得到某些活性成分,国内外已开始了一些人参皂甙的转化工作。本文以三七叶甙为原料,通过乙酸水解和柱层析分离得到20(R)-人参皂甙-Rh2(1)、人参皂甙Rg3(2)和20(S)-人参皂甙Rg3(3)。其结构经光谱分析、化学降解及与标准品对照鉴定。 1　实验部分 1·1　仪器和试剂 Bruker DRX-500核磁共振仪,C5D5N为溶剂,TMS为内标。层析硅胶(青岛海洋化工厂),高效硅胶G板(烟台化工研究院),显色剂为15%硫酸乙醇溶液。所用溶剂为重蒸工业纯,其它试剂为分析纯或化学纯。三七叶总甙(含甙元以原人参二醇计算,含量不少于32%)购自云南永昌植化厂。 1·2　三七叶总甙乙酸水解和化合物3的碱水解12 g三七叶总甙,加入300 ml 50%乙酸水溶 液中,70℃水浴加热6 h,冷却,搅拌下加入5%碳酸钠溶液。过滤,滤液用正丁醇萃取。沉淀以甲醇-氯仿溶解,进行硅胶柱层析,以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2∶2∶4∶1,下层)洗脱,薄层层析检查,合并相同组分,得到主含化合物1的组分和其它部分。主含化合物1的组分以硅胶柱层析(氯仿-甲醇9∶1)再分离纯化,甲醇-水重结晶得无色针状晶体1(100 mg)。其它部分与正丁醇萃取物合并进行硅胶柱层析,以氯仿-甲醇梯度洗脱,得到主含化合物1、2和3的组分。主含化合物2的部分以甲醇反复处理得白色无定型粉末2(140 mg),主含化合物3的部分经反复硅胶层析(氯仿-甲醇95∶5)、反相柱层析(Rp-18,甲醇-水85∶20)和甲醇处理,得白色无定型粉末3(20 mg)。取化合物3少量,加2 mol/L氢氧化钠水溶液5 ml,沸水浴加热4 h,冷却,以乙酸乙酯萃取。萃取液浓缩后,溶于甲醇,与原人参二醇标准品对照,进行薄层层析(苯-丙酮8∶2),具有相同点。 化合物1,无色针晶(MeOH-H2O);1H-NMR:1·69(3H, s,Me-26), 1·65 (3H, s,Me-27),1·39,1·32,0·80(各3H,s,Me×3),1·00(9H,s,Me×3),4·96(1Hd,J=7·7 Hz,葡萄糖的H-1’);13C-NMR:甙元部分C-1→C-30:39·2,26·7,88·8,40·0,56·4,18·5, 35·2, 37·0, 50·4, 39·7, 32·2, 70·9, 49·2, 51·8, 31·4, 26·8, 50·6, 16·8, 16·4, 73·0, 22·8,43·3,22·6,126·1,130·8,25·9,17·7,28·2,15·9,17·4,糖部分C-1’→C-6’:107·0,75·8,78·8,71·9,78·4,63·1。 化合物2,白色无定型粉末;正反相硅胶薄层层析与人参皂甙-Rg3对照,Rf值均相同。13C- NMR;甙元部分C-1→C-30;39·0,26·6,88·8,39·9,56·2, 18·3, 35·0, 36·8, 50·5, 39·5, 32·0, 70·7,49·1, 51·6, 31·3, 26·5, 50·2, 16·4, 16·2, 72·8,22·6,43·1,22·4,125·9,130·6,25·6,17·5,26·6,15·7,17·2;糖部分C-1’→C-6’:104·9,83·4,78·0,71·5,77·8,62·6;C-1”→C-6”: 105·9,77·0,78·271·6,77·9,62·7。 化合物3,白色无定型粉末;13C-NMR:甙元部分C-1→C-30:40·1,27·1,91·1,41·0,57·4,19·1,6·0, 37·9, 51·2, 40·4, 33·4, 71·4, 49·0, 52·0,32·6, 26·9, 54