GSNH抗生育机理的研究.pdfVIP

·32· Chinese ofHuman Journal V01．18No．8 中国性科学2009年8月第18卷第8期The SexualityAugust，2009 ·基础研究· GSNH抗生育机理的研究 李立梅1 赵晓青2郭忠辉1王静力1 1吉林省人口生命科学技术研究院，吉林长春130041 2长春生物制品研究所，吉林长春130062 【摘要】通过研究棉酚衍生物一牛磺酸棉酚(GSNH)对大鼠精子乳酸脱氢酶的作用机理发现，随着大鼠服药量的 抑制精子线粒体特异性酶一LDH—X，使精子的浓度能量来源被彻底阻断，从而产生了抗生育作用。 【关键词】棉酚衍生物；乳酸脱氢酶；机理；抗生育 棉酚(Gossyp01)是我国首创的男性避孕药，对棉对照组。阳性对照组给醋酸棉酚30mg／(kg·d)；阴性 酚的研究和I临床观察中发现，长期使用棉酚具有一定 对照组给服同样量的0．5％的CMC；样品高剂量组给服 的毒副作用¨J。为达到既保持棉酚抗生育性能，又降 GSNH 30mg／(kg．d)；样品低剂量组给服GSNH15rag／ 低棉酚毒副作用的目的，我们进行了棉酚的分子结构 (kg·d)。自制胃管灌喂实验动物6次／周，连续56天。 改造旧。J，合成了棉酚衍生物GSNH，并对它的抗生育 1．2．2 提取将大鼠解剖，取睾丸及附睾，首先 机理进行了研究。研究发现GSNH作用机理与棉酚相去除睾丸周围的脂肪、剥除被膜、称重、分离得到精子， 似，GSNH通过竞争抑制精子线粒体特异性酶一LDH —x，使精子的能量来源被彻底阻断，从而发生了抗生 (0．2M蔗糖、5mMTris、1mMEDTA、PH7．5)，剪碎组 育作用。 心10rain，沉淀加去离子水在一30℃冰箱中放置2h，室 1 材料与方法 1．1 主要材料、试剂与大型仪器 心lOmin后，取上清为精子匀浆液做电泳分离。 (1)GSNH，由吉林省人口生命科学技术研究院实 1．2．3 电泳条件及实验方法聚丙烯酰胺盘状 验室提供。(2)棉酚、醋酸棉酚(山东中医药大学提电泳分离同功酶，加以下显色液作用显示LDH同功 供)和GSNH溶液配制：先分别以1％羧甲基纤维素 PH (CMC)助溶，再以蒸馏水稀释，配制成所需要的浓度。磷酸缓冲液0．5M (3)Wistar大鼠，由吉林大学动物室提供，平均体重 ⑤吩嗪甲酯硫酸盐(PMS)2mg／ml；@5mMMgCl：溶液。 2309。(4)所用各种酶及显色物质等生化试剂均为 Sigma产品；普通试剂为分析纯以上。(5)紫外分光光45—120rain，至同功酶区带清晰可见，取出胶柱，用水 度计，日本岛津UV一260。(6)超声细胞粉碎仪，美国洗去显色液，7．5％醋酸终止酶促反应，观察结果。 Soniprepl50。(7)低温高速离心机，美国BeckmanJ2一 2 结 果 MC。(8)电泳仪。 1．2 实验方法 结果发现，大鼠精子的乳酸脱氢酶同功酶电泳中， 1．2．1 动物分组、剂量及给药方法健康成熟雄 阴性对照组精子匀浆经电泳分离显色后可分成6条紫 色的区带，泳动最快的是LDH—l，最慢的是LDH一5， 性大鼠，平均体重2309；40只大鼠分成四组，10只／组。 分别为阳性对照组、样品高剂量组、样品低剂量组、阴性 在LDH一3、LDH一4之间出现