8种胞外酶在香菇不同生长阶段的活性变化.pdfVIP

圜 澎讧右鼻种学 2014年第4期 文献著录格式：王伟科，陆娜，周祖法，等．8种胞外酶在香菇不同生长阶段的活性变化[J]．浙江农业科学，2014(4)：498—501 8种胞外酶在香菇不同生长阶段的活性变化 王伟科，陆 娜，周祖法，宋吉玲，袁卫东，闫 静 (浙江省杭州市农业科学研究院，浙江杭州310024) 摘要：研究了香菇生长过程不同阶段胞外酶纤维素酶系(羧甲基纤维素酶、滤纸纤维素酶、口-葡萄糖苷 酶)、木质素酶系(漆酶、愈创木酚酶、多酚氧化酶)、淀粉酶、半纤维素酶的活性变化。结果表明，香菇生长 不同阶段均能检测到上述8种酶的活性，说明这些酶参与了香菇生长发育的全过程。各种酶活性峰值出现时间 不尽相同，木质素酶的活性高峰出现在营养生长期，纤维素酶的活性高峰出现在生殖生长期，说明香菇生长过 程中优先利用木质素。8种酶活性在香菇生殖生长阶段变化趋势较一致，从原基形成到子实体成熟均呈现逐步下 降趋势。 关键词：胞外酶活性；香菇；不同生长阶段；变化规律 中图分类号：S646 文献标志码：A 文章编号：0528．9017(2叭4)04_0498旬3 香菇属担子菌纲、伞菌目、侧耳科、香菇 另1份样品置于80℃下烘至恒重，称重。 属…，其主要栽培基质是杂木屑。香菇生长过程 1．4 葡萄糖和木糖标准曲线制作 中所需的营养主要通过菌丝向胞外分泌各种酶将木 按参考文献[3]的方法制作葡萄糖和木糖的 质纤维素及其他有机大分子物质降解后再吸收进细 标准曲线。得到葡萄糖标准曲线回归方程y= 胞，并转化为蛋白及多糖等旧1获取。研究不同培 0．812x一0．037，尺2=0．9586，木糖标准曲线回 3x一0．027 4。 养条件对香菇胞外酶活性影响的报道较为多见，但 归方程y=0．780 6，R2=0．983 对香菇从菌丝生长到子实体成熟采收全过程中的酶 1．5 胞外酶活性测定与定义 活性变化研究报道甚为少见，为此测定并分析了8 羧甲基纤维素酶。往试管中加入O．5％的羧甲 种胞外酶在香菇生长过程6个重要阶段的活性及变 m01．L。1醋 基纤维素钠溶液(用pH值4．6，0．1 化过程，旨在深入了解香菇对栽培基质的降解利用 酸盐缓冲液配制)1．5mL，再加入粗酶液O．5mL， 规律和生长发育过程中的生理变化，为栽培基质配 混匀，50℃恒温水浴保温30min，取出后立即加 方的设置提供理论依据。现将有关结果报道如下。 入DNS试剂1．5mL，煮沸5min，取出，冷却后加 蒸馏水定容至20mL，充分混匀。分光光度计540 l材料与方法 nm波长处测光密度值(D)，以煮沸灭活的酶液作 1．1 菌种 对照，每组3次重复，取平均值。酶活力单位定 香菇808引自缙云县山农农产品科技开发有限 义：1g于培养物中的酶量与底物作用30min释放 公司。 出1mg葡萄糖为1个活力单位(U)。 1．2培养基配方 滤纸纤维素酶。往试管中加入粗酶液0．5mL， 杂木屑78％，麸皮20％，石膏1％和糖1％。再加入滤纸条50 cm×6 mg(新华定量滤纸