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用BrdU法研究γ射线外照射诱发外周血淋巴细胞HPRT基因突变.pdf
辐射研究与辐射工艺学报 第20卷 o．713cv／min。照射环境温度保持在37℃左右。 1．2 离心10min，弃去上清后再重复1次。在离心后的沉淀中加人生长培养基(内含80％RP— 行做5个样本，每个样本培养两瓶，其中l瓶加入6一‘rc】×lomoL，L。所有培养瓶中含生长 moL，L Brdu．再避光直立培养 培养基4．5mL，加血o．5mL。在37℃培养24h后加入5×10 16h[“。 1．2．3收获细胞和制片将培养物加入离心管，1500转／min离心lo“n，吸去上清后，加入 0．075moL／LKcl 去上清。重复固定1次后，加适量固定液搅匀．滴于预冷的玻片上，空气干燥后用Hoechst 1 2．4阅片及淋巴细胞转化率和基因突变频率(muIationf”quencies，MFs)的计算盲法阅 片不加6一TG的样本计数3000个转化及未转化淋巴细胞，加6一Tc的样本计数突变细胞，各 种细胞的鉴别标准见参考文献[2]。 淋巴细胞转化率=(转化淋巴细胞数／3000个转化及未转化淋巴细胞)×100％ 淋巴细胞突变率(MFs)=突变淋巴细胞数／(o．5mL正常人外周血淋巴细胞数×淋巴 细胞转化率) 1．2．5 组之间的两两比较，具体步骤见参考文献[3]。 2结果 2．1外周血淋巴细胞转化率与Y射线照射剂量之间的关系 表1为外周血淋巴细胞转化率与1射线照射剂量之间的关系。由表l可知，淋巴细胞转 化率随剂量增加而下降。当剂量为O．5G)r时，转化率就已明显下降，与对照组相比有统计学 细胞数明显下降。淋巴细胞转化率与照射剂量之间的关系可用线性模型关系式表示：l，=63． 系数r=O．8557(见图1)。 Tab．11he betw神n tra珊f0珊adon—rac姻aⅡdmmanond惦皓of rdaⅡ蛳ship lymphoeytic Ynys Gro“pR础鲥仰 Number0fcalculatedNⅢIlberof姗nsf0瑚edTr蚰sf0咖8tion—rate 堂!型竖! !z!坐!竺理塑 !!里P!!!姓塑 !丝 Contr。l 0．0 18000 13014 72．3239±22435 Nol O．5 18000 10998 61．1904±66182(’’ No2 1 0 18000 7884 438240±88563(2) Ho．3 2O 18000 7259 40．3278±87916(21 No一 4．0 18000 6216 345425±82765‘2) wim wilhc佃troland No ‘1’po．05(comp且rillgcontr01)，‘2’P(0．01(c呵pari“ggrouP1)，i±日 2．2照射剂量与外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率之间的关系 表2为淋巴细胞HPRT基因突变频率之间的关系。由表2可知，随着1射线照射剂量的 rPRT基因突变 189 第3期 赵涛等：用Brdu法研究1射线外照射诱发外周m淋巴细胞I MFs与对照组、实验l组相比有非常品著差异(P0．叭)。照射剂量与MF8之间的关系符合 7306+o 线性平方模型，拟合的剂量效应关系函数为：y=0 7774D+o．0706D2。其相关系数r =
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