气相色谱法系统分析植物叶中多种脂肪酸.pdfVIP

气相色谱法系统分析植物叶中多种脂肪酸 胡兹苓 （南京林业大学，210037） ［提要］用毛细管气相色谱和色谱-质谱联用对植物叶中多种脂肪酸进行了系统分析，其中除了常 见的C12C22的饱和与不饱和脂肪酸外，还有以前报道不多的有取代基的脂肪酸。 用气相色谱研究植物体中常见的脂肪酸已有很 仪；Spectra Physics处理系统；OV-73玻璃毛细管 多报道［14荩，在鉴别方法上，大都采用等价碳链长度 柱，0.32mm 25m;程序升温：60(1min)以10/ 等保留值对照的方法。但是，在碳链数相同而同时存 min升至150(1min)再以4/min升至290 在多种双键位置异构体的情况下，往往因保留值十 (10min);He载气；FID检测，300；不分流进样。内 分接近而难以准确判别；在分析的样品方面，多局限 标法求出所有经鉴定确认为脂肪酸的成分，再计算 于植物油含量丰富的器官，而对其它部位，如叶、茎、 求出各脂肪酸成分在总脂肪酸中的重量百分含量 皮层等脂肪酸含量少但成分复杂的部位研究不多； (W％)。 并且在所测定的成分上，多侧重于常见的C12C22 （四）GC-MS条件 Finnigan4021色-质联用 的饱和与不饱和脂肪酸，而对有取代基的脂肪酸研 仪；电子轰击源(EI)70eV；扫描范围45-645 究较少。为了更全面地研究植物脂肪酸成分，作者在 (m/z)，扫描周期2s。 前人工作的基础上(5)，采用了系统测定和鉴别植物 脂肪酸的方法，特点是以柱色谱分离极性小的脂肪 酸甲酯(组分1)和极性大的脂肪酸甲酯(组分2)，用 毛细管程序升温气相色谱分别测定以上两部分，配 合以质谱鉴定，可以得到植物叶、皮层等部位脂肪酸 成分的较丰富的资料。 实 验 部 分 （一）原理 将混合脂肪酸甲酯用柱色谱分离为 极性小的和极性大的两部分。极性小的组分1可直 接用气相色谱测定。极性大的组分2在 基甲酯化、 羟基硅烷化后再用气相色谱分析。 （二）样品处理 低温真空干燥后的植物样品加 入十九烷酸C19：?和 -OHC14分别作为组分1和 组分2的内标，KOH-甲醇皂化后，有机溶剂除去不 皂化物，碱性硅胶柱除去甾薮醇等中性类脂，所得脂肪 酸经与BF3-甲醇起甲酯化反应后，将所得甲酯化产 结 果 与 讨 论 物过压力硅酸柱（Silicagel,230400目；N2压力）， 用上述方法测定了四种针叶和阔叶树的树叶 用二氯甲烷：正己烷＝1：3V/V）洗出第一组分， 脂肪酸，从图1和表1的结果看：在所分析阔叶中亚 用二氯甲烷：乙酸乙酯＝7:3(V/V)洗出第二组 麻酸C18：3(9,12,15）的含量占总脂肪酸总量的一半左 分。组分1直接色谱分析，组分2经（双-三甲基硅烷 右，为第一大组分，其次是棕榈酸C18：?，亚油酸 基）三氟乙酰胺（BSTFA）硅烷化反应后色谱分析。 C18：2(9,12)。图2以棒子树为例表示了树叶的常见的 （三）GC条件 组分1和2在相同色谱条件下 脂肪酸中各成分的百分含量。与阔叶树不同，针叶脂 分别进样分析。CARLO ERBA HRGC 5300型色谱 肪酸中亚油酸含量较高，而亚麻酸、棕榈酸占的比例 相对较低。 的是在针叶中几乎不存在 -OH取代的脂肪酸，而