放射免疫法快速检测猪尿样中的四环素类药物残留 Detection of tetracyclines in pork urine by radioimmunoassay method.pdfVIP

《鱼壁王些》：至QQ皇重复曼Q篓笪!曼塑 竺型垂!固 放射免疫法快速检测猪尿撵中的四环素类药物残留 林杰黄晓蓉郑晶 陈彬黄嫦娇 摘要 实验主要探讨应用CharmⅡ放射免疫分析方法检测猪尿中四环素类药物残留。确定控 制点设定的方法，评价了免疫反应体系的灵敏度和特异性，验证了四环素类最大残留限量3000斗g／kg 的检测稳定性，30min可出检测结果。 关键词放射免疫分析方法；四环素类药物；猪尿 中图分类号$816．73 四环素类抗生素是由链霉菌产生或经半合成制 特点．并且可以检测四环素类药物残留总量，已经被 取的一类碱性的广谱抗生素，化学结构具有氢化并四 欧盟国家和美国FDA认可并且应用进行初筛分析ttl， II放射免 苯基本母核。由链霉菌直接产生的有四环素、土霉素、 本研究建立了尿样中四环素类残留Charm 金霉素。半合成制取的有美他环素(甲烯土霉素1、多 疫分析方法。评价了免疫反应体系的灵敏度和特异 西环素(强力霉素)、米诺环素(二甲胺四环素)等。能性．验证了四环素类最大残留限量3000 p。g／kg的检 抑制革兰氏阳性和阴性细菌、支原体、衣原体、立克 测稳定性。30min可出检测结果。 次体、原虫和螺旋体，可用于防止畜禽病害．促进幼 1材料和方法 年畜禽生长等。但该类药物能引起骨骼畸形和生长 1．1设备和材料 抑制，并可造成肝肾损害，引起变态反应fl-21。我国农 业部2002年12月发布的《动物性食品中兽药最高残 产)、IEC离心机、涡旋混合器、恒温孵育器【(35±1)℃]、 留限量》和香港特别行政区《药物、化学物及其最高 闪烁液加液器、50ml离心管、硼硅玻璃试管及试管 残余限量》以及欧盟、美国等国家，均规定食品中四 塞、药片压杆。 环素类的最高残留限量：土霉素、四环素、金霉索均 1．2样品和试剂 小于100 检测基质为猪尿。 I-Lg／kg。因此，加强对四环素类药物的残留监 控对于食品安全而言有着重要意义。四环素类药物检 四环素类Charm 11检测试剂盒、闪烁液(Optiflu— 测方法分为微生物测定法、免疫分析技术、色谱分析 or)、阴性对照液、多抗标准品，以上试剂均由美国 技术等三类。微生物测定方法灵敏度高，检测限低，是 Charm公司提供。 一种价格低廉、操作简便的快速初筛方法，但特异性 四环素类药物标准品：四环素、土霉素、金霉素， 低，假阳性率较高。免疫分析技术则包括目前应用广 以上标准品由Sigma公司提供。 泛的基于微生物受体反应的放射性标记技术和酶联 恩诺沙星、新霉素、庆大霉素、链霉素、螺旋霉素、 免疫分析技术。ELISA灵敏度高、特异性好，但前处理林可霉素、磺胺二甲嘧啶、氯霉素、红霉素、青霉素G 复杂。色谱分析技术普遍存在前处理复杂、测定周期 等标准品．以上标准品由Sigma公司提供。 长等缺点。但由于其准确度高、特异性好，常被作为确 1．3方法 证方法／3-6／。基于细菌受体分析的CharmII放射免疫法 1．3．t测试原理 的样品前处理方法简便，具有灵敏度高、特异性强的 本方法的基本原理是微生物细胞表面存在着能 与各种四环素类药物共有功能基团相结合的特异性 位点，能与各种四环素类药物发生相应的微生物受体 林杰，福建出入境检验检疫局技术中心食品所，高级工程 反应。检测四环素类药物残留时，同时加入微生物受 师，350003，福建省福