常规HE染色易出现的问题_原因及解决方法.pdfVIP

·500 · J Diag Pathol ,December 2008 ,Vol . 15 ,No . 6 ·技术交流 · 常规 HE 染色易出现的问题 、原因及解决方法 (北京军区总医院 病理科 , 北京 　100700) 田玉旺 ,李 　琳 ,朱红艳 ,邢 　宜 ,苗金红 　 [ 关键词] 　HE 染色 ; 　问题 ; 　方法 ( ) [ 中图分类号] 　R3612 　[文献标识码] 　B 　[文章编号] 1007 - 8096 2008 06 - 0500 - 03 　　常规 HE 染色切片质量的好坏是病理技术人员时刻关 醇的存在致使切片更易脱落 ,因为乙醇具有脱水及使组织收 注的问题 。影响 HE 染色切片质量的因素是多方面的 ,本文 缩的作用 ,分化后水洗时组织又发生吸水 、膨胀 。而造成脱 从以下几个方面详细分析原因并提出具体的解决办法 ,供同 片 。为此 ,我们认为改用 1 %盐酸水溶液进行分化 ,可避免 行参考 。 脱片现象的发生 ; ⑤染色失当或效果不良,返工重做 ; ⑥染液 及染色用具不洁净 ; ⑦脱片与水质有关 。由于各地区水质不 1 　染色中组织切片脱落的原因 同 ,有的地区自来水内含有大量的矿物质 ,故漂片用水的纯 1. 1 　组织自身原因及处理不当 　①组织 自身原因 ,如凝血 净与否亦是造成组织脱片的一个重要因素 。 块 、血栓 、干涸或过硬的组织及组织碎屑等 ,其切片染色时易 脱落 ; ②组织脱水 、透明不足 , 以致石蜡不能浸入勉强切出的 2 　切片染色不均的原因 片子 ,脱蜡时收缩 ,入水或染色后又膨胀 , 因而易脱落 ; ③组 2 . 1 　组织取材固定不当 　如组织取材过大或过厚 、所用之 织脱水 、透明过度 ,浸蜡时间过长或温度太高 ,引起组织收缩 固定液浓度过大 、穿透力较小时 ,不能将组织完全固定 ,组织 硬脆 ,导致切片不完整 ,染色时导致脱落 。 切片染色后出现切片外周固定好的部位细胞着色清晰 ,但中 对发脆的组织可选用下面方法处理 ,使切片完整 、不易 间或未固定好的组织细胞着色模糊 ,从而造成染色不均 。 脱片 : ①用棉球蘸 5 %氨水或 20 %冰醋酸涂抹蜡块组织表面 2 . 2 　组织脱水时间过短 　组织中含有水分 ,进而使透明、浸蜡 10 s左右 ; ②蜡块修出组织面 ,放入冰水混合液中几分钟或用 不彻底 。这种处理不彻底的组织 ,虽然有时也能勉强切片 ,但切 冰块贴敷组织面 。 片薄厚不均 ,在染色时就会出现染色不均 ,片状灰染现象。 1. 2 　切片 　①切片过厚 ,组织附贴在载玻片上不平 ,使切片 2 . 3 　切片厚薄不均或有横纹 与玻片之间存有一定间隙 ,切片与玻片之间的吸附力减弱 ; 2 . 4 　染色过程处理不当 　①组织切片脱蜡不彻底 ,如溶蜡 ②破碎不整齐的切片 ; ③展片水温低 ,切片有皱褶 、附贴不牢 剂及乙醇不纯或使用时间过久 、室温低时 ,组织切片上的石 或附贴时切片下含有气泡 ; ④烤片时间短或温度低 、烤片温 蜡没有全部除掉时、含蜡部分不着色或着色较浅而无蜡部分 度过高或时间过长 、组织被烤焦或收缩变形发生皱褶均易脱 着色较深 ,因此造成染色深浅不均 ; ②染液或试剂量少 ,组织 片 ; ⑤载玻片清洗不洁净 ,含有油脂或混入脏东西等 。故载玻 切片没被全部浸染到 ; ③分化不当、分化剂浓度过大 、分化力 片应先放入清洗液内浸泡 ,捞出后彻底水洗 ,95 %乙醇进