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实验五血清总脂测定香草醛法.ppt
* * 血清总脂的测定 (香草醛法) 一、实验目的 1 学习血清总脂的测定方法及原理 2 了解分光光度计的用法 二、实验原理 血清中脂类,尤其是不饱和脂类能与浓硫酸作用,并经水解后生成碳正离子.香草醛中被浓硫酸活化的羟基即与碳正离子起反应生成红色的醌化合物,其强度与碳正离子成正比. 三、实验步骤 ? 试管 ? 试剂 空白管 标准管 测定管 血清(mL) ? ――― ? ――― 0.02 胆固醇标准液(mL) ? ――― ? 0.02 ? ――― 浓硫酸 (mL) 1.0 1.0 1.0 充分混匀,放置沸水浴10min,使脂类水解,冷水冷却 显色剂(mL) 4.0 4.0 4.0 充分混匀,放置20min,再用分光光度计测其密度 ? 四、 计算: 测得结果: OD测= OD标= C标 × OD测 血清总脂浓度(mg/100mL) = --------------------- OD标 OD测 = ---------------------× 600 OD标 ? 五、分析讨论
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