人胆固醇醋水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染.pdfVIP

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2015-08-26 发布于重庆
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人胆固醇醋水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染.pdf

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人胆固醇醋水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染.pdf

人胆固醇酯水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染顾立学。罗俊生’，王瑞，冯旭，关宁，霍晓川 (辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州121001) 编码区序列获得1条约1．7 hCEH大量表达。关键词：人胆固醇酯水解酶；真核表达载体；单核巨噬细胞；U937细胞；转染中图分类号：R543．5文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2011)26-0014-03 Construorionof vector andestablishmentofstable eukaryoticpEGFP-N1-hCEH transfectantU937cellline GU Xiao—chuan Li—x,u．e，LUOJun-sheng，WANGRui，FENGxu，GUANN讽g。HUo (FirstAffiliated Medical 121001，P．R．China) HospitalofLiaoningUniversity，Jinzhou Toconstructhumanchdesterolester vector Abstract：Objective hydrolase(hCEH)eukaryoticexpressionpEGFP— N1-hCEH．andobservetheir cellline13937 HumanfivercellfinesL广02total monocyte—macrophageexpression．Methods RT—PCR hCEH wereinsertedinto RNA船template，amplifiedby appficafionscodingsequence，theamplifiedfragments wassubclonedinto vectorrestriction pMDl9一T fragment pEGFP-N1eukaryotieexpressionby vector，recovery，purification its in transfected cellfine ob∞lVe enzyme U937，and expression digestion，DNAsequencing，themonocyte-macrophagc U937cells．ResultsRT-PCR of hCEHobtaina1．7Ida ofthe fine treaty．in amplificationgenecoding$equenoe fragment withthe size．Recombinant Was constructedwitll as expectedfragment plasmidpEGFP-N1-hCEHsuccessfully pEGFP-N1 inU937cells．ConduslonsThe carrier．Genetransfection showedthattherecombinant