离子色谱法测定液态奶中的硫氰酸根.docVIP

离子色谱法测定液态奶中的硫氰酸根 林立1，王海波2，韩春霞3 国家食品安全监督检验中心 北京 100094 linli77422@ Dionex中国有限公司应用研究中心 北京 100085 摘要：研究了液态奶中硫氰酸根的离子色谱测定方法。建立了离子色谱法测定液态奶中硫氰酸根的检测方法。样品经乙腈沉淀蛋白后，将上清液离心过滤，稀释后过OnGuard RP柱除去样品中的脂肪，而后进样至离子色谱，以IonPac AS16分析柱进行阴离子交换分离。在0.02~1.0 mg/L质量浓度范围内，硫氰酸根工作曲线的线性相关系数r为0.9996，对样品进行加标，硫氰酸根的回收率为85-97%。该方法方便可靠，可应用于液态奶中硫氰酸根的 检测。/down/showdown.asp?id=2079 关键词：硫氰酸根；离子色谱；液态奶 引言 硫氰酸是无色、易挥发、有强烈气味的强酸性液体，略有毒性。硫氰酸稀溶液稳定，如加热或与氢硫酸及无机酸作用，可分解成为氰化物，有剧毒。有文献研究发现加入微量的硫氰酸盐和过氧化氢，会在牛奶中获得最好的应用抗菌的乳过氧化物酶(LP)体系活动[1]，可作为一种可靠的方法保存冷却过的或未冷却过的生奶质量。卫生部最近禁止使用的添加剂名录中规定:硫氰酸根不可以作为乳及液态奶的添加剂。 文献报道的硫氰酸根的检测方法有阴极溶出伏安法[2],GC-MS法[3]和离子色谱法[4]，且应用于乳制品中硫氰酸根的检测鲜见报导。本研究建立了测定液态奶中硫氰酸根的ｖ法, 方法简便、快速, 实用性强, 回收率好, 检测结果稳定可靠。 /down/Index.shtml 1 实验 1.1 仪器和试剂 ICS-1000离子色谱系统（美国Dionex公司）：带RFC-30淋洗液自动发生系统，配置KOH（氢氧化钾）淋洗液罐；电导检测器；自动进样器及Chromeleon色谱数据处理工作站；阴离子交换分离柱，包括IonPac AS16分析柱（250mm×4 mm）和AG16保护柱（50mm×4 mm）。/Product.asp?action=searchdq=1860proClass=0textitle=分离柱 硫氰化钾准品(纯度99.0%)，标准储备液及工作液的配制：将硫氰化钾标准品用超纯水配制成1 mg/mL的储备液(按硫氰酸根计算)，于4 ℃条件下保存。使用时用水稀释，配制成不同浓度的混合标准工作溶液。乙腈( Fisher，色谱纯) ；超纯水(Millipore超纯水器制备)。 1.2 色谱条件 流动相为EG产生氢氧化钾淋洗液（KOH）：0~13min，浓度45mmol/L；13~18min，浓度70mmol/L；流速为1.0 mL/min；色谱柱温度为30 ℃；检测器为电导检测器；进样量为100μL。 1.3 样品前处理 直接量取混合均匀的液态奶样品4mL至玻璃刻度管中（定容），加入5 mL色谱纯乙腈，涡旋混匀，常温下沉降10min。取沉降好的样品，取上清液用超纯水稀释10倍 (如上清液较少，可离心后提取上清液)，过0.22μm的滤膜，过1.0cc OnGuard RP柱除去样品中脂肪和蛋白质，然后进样检测。OnGuard RP柱在使用前依次用5mL甲醇和10mL水活化，放置20min后使用。 2 结果与讨论 2.1色谱柱的选择 IonPac AS16色谱柱为强亲水性的阴离子交换柱，对于疏水性离子的分离具有分离时间短、分离度高、峰形对称等特点。采用合适浓度的OH-溶液等度淋洗，SCN-在12min内实现迅速分离，分离效果非常理想。该系统用于硫氰酸根的分析，既克服了样品中基体离子的干扰，又大大缩短了SCN-的保留时间。由于硫氰酸根属于疏水性阴离子，在阴离子交换色谱柱上保留相对较强，因此一般情况下需要浓度较高洗脱能力较强的淋洗液进行淋洗，或者需要进行梯度淋洗，从而得到更好的效果。本实验选择了浓度为45mol/L的KOH进行等度淋洗，并在SCN-出峰后，使用高浓度的KOH淋洗液冲洗5min的色谱柱，将吸附在色谱柱上的强保留性的物质洗脱下来，然后需要平衡回到起始浓度。因此本方法选用了KOH梯度淋洗作为实验条件。 2.2液态奶前处理条件的确定 液态奶中含有大量的蛋白和脂肪，这些需要在进入色谱柱之前除去。常用的去除奶中蛋白的方法有酸沉降、盐沉降和有机溶剂沉降。温度对沉降效果有显著影响。低温条件下（0℃），蛋白沉降效果明显快于常温条件，但常温沉降的回收率要明显高于低温沉降。选择牛奶与乙腈比为4︰5来沉降蛋白。沉降蛋白需要的时间为10min左右。4种液态奶的色谱图如图1所示。 2.3 线性范围、检出限及回收率 配制硫氰酸根质量浓度为0.02，0.05，0.10，0.50，1.00 mg/ L 的系列标准品溶液, 按照1.2中的色谱条