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叶酸修饰的多柔比星隐形脂质体对 HeLa229 荷瘤裸鼠的抑瘤作用 1 1 2 3 * 刘敏 ，潘俊 ，姚明 ，周光兴 ，陆伟跃 1 1.复旦大学药学院药剂教研室, 上海(200032) 2.上海市肿瘤研究所, 上海(200032) 3.复旦大学实验动物部, 上海(200032) email: wylu@ 摘要：考察多柔比星叶酸隐形脂质体对荷瘤裸鼠肿瘤生长抑制作用。pH 梯度法制备多柔比 星叶酸隐形脂质体（F-S-L-DOX ）和普通隐形脂质体（L-DOX ）。在荷瘤裸鼠瘤旁给药后， 比较两者对瘤体动态变化趋势、瘤体组织病理学差异和瘤体中肿瘤细胞内DNA 质量的影响 等。结果表明，F-S-L-DOX 对荷瘤裸鼠具有显著的抑瘤效果，F-S-L-DOX 抑瘤率略高于 L-DOX ，但两者抑瘤特性明显有别。 关键词：叶酸隐形脂质体；多柔比星；HeLa229 细胞；体内抑瘤作用 中图分类号：R944.9 1．引言 叶酸受体（FR ）是一种被磷脂酰肌醇结合在细胞膜上的叶酸结合蛋白（folate binding protein ），在众多人源性肿瘤（如卵巢、鼻咽、子宫内膜、肾和宫颈癌等）细胞膜上有过度 表达和高活性[1-4] 。除肺、胎盘、脉络从、肾脏的近曲小管和小肠的刷状膜外，其它正常组 织细胞上FR 的表达和活性均低于上述肿瘤细胞。文献报道肾脏的FR位于近曲小管内腔的极 化上皮细胞膜上，FR 的功能是重吸收尿液中的叶酸进入血液循环。另外，肺部的FR位于极 化上皮细胞的顶端，不接触血液中的叶酸复合物，不会导致叶酸复合物在肺中的蓄积。FR 在多种人肿瘤细胞上的高表达使之成为了针对这些肿瘤的靶向药物传释系统的良好靶标。因 此，将其配体－叶酸，与生物活性物质或药物传释系统进行化学耦合，便成了靶向富集FR 肿瘤的途径之一。上述研究结果为开展FR介导的靶向抗肿瘤药物研究奠定了理论基础。 1994 年起，文献报道了叶酸隐形脂质体（folate-stealth- liposome，F-S-L ）作为抗肿瘤 药物载体的研究[5-10] 。细胞培养结果表明，粒径 60～130nm的F-S-L可通过FR介导的细胞内 吞作用进入肿瘤细胞。且能与游离叶酸竞争结合肿瘤细胞表面的FR ，只有在高浓度游离叶 酸存在时受体才能被叶酸所占据，说明经叶酸修饰的隐形脂质体与肿瘤细胞表面FR 间的亲 1 1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金资助(项目编号：20030246050) 1 和力很高。本实验室前期研究表明，粒径为 200nm 的F-S-L也能通过细胞膜上的FR介导入胞， [11] 并能显著靶向富集FR 的HeLa229 （人宫颈癌细胞） 。然而与普通隐形脂质体（Stealth Liposome ，S-L）比较，F-S-L在动物体内的生物半衰期及肿瘤组织滞留量无显著提高。且药 效学研究表明腹腔给药包载多柔比星（Doxorubicin, 1）的F-S-L抑制肿瘤生长的作用显著， 而静脉给药的F-S-L抑瘤作用与普通脂质体等效 [12-14] 。鉴于此，本研究制备并考察了包载 1 的F-S-L对HeLa229 荷瘤裸鼠的抑瘤作用，以进一步研究F-S-L作为药物载体的体内抗肿瘤作 用特点。 2 ．系统介绍 2.1 仪器与试