GB/T 5413.12-1997婴幼儿配方食品和乳粉　维生素B2的测定.pdf

GB(T5413.12-1997 前 言 本标准给出两种方法，方法一是荧光法，重现性好，准确度高。方法二是高压液相色谱法，测定速度 J决。 本标准方法一为仲裁法。 本系列标准从实施之日起，代替GB5413-85, 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳品标准化中心归口。 本标准负责起草单位 国‘家乳制品质量监督检验中心、浙江省轻工业研究所。 本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服 务有限公司。 本标准主要起草人:李茂胜、任一平、黄百芬、郎昭斌、陈青俊、王芸。 中华人民共和国国家标准 婴幼儿配 方食 品和 乳粉 GB/T5413.12-1997 维生素B2的测定 代替GB5413-85 Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren -DeterminationofVitaminB2content 1 范围 本标准规定了用荧光法和高压液相色谱法测定维生素B,的方法. 本标准方法一适用于乳粉中维生素B2含量的测定;方法二适用于婴幼儿配方食品和乳粉中维生素 B,的测定。 方法一 荧光法 2 方法提要 样品在稀盐酸溶液中经消化，调整pH值，过滤，除去蛋白质等物质后，滤液加高锰酸钾氧化除去干 扰物，此溶液中维生素B，在激发波长440nm、发射波长565nm下可产生最大荧光强度，与标准样品做对 照试验，可得维生素B:含量。 3 试荆 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1盐酸,c(HC1)为0.lmol/L, 3.2氢氧化钠:c(NaOH)为400g/L, 3.3 冰乙酸。 3.4 高锰酸钾:c(KMnO,)为40g/L, 3.5 过氧化氢:体积分数为3%. 3.6 连二亚硫酸钠(NaS104·2H20), 3.7 维生素B:标准溶液 3.7.1维生素B,标准贮备液，浓度为100pg/mL, 准确称取于暗处五氧化二磷条件下干燥过夜的维生素B250.Omg,溶于。.02mol/L的乙酸中，定容 至500mL，甲苯条件下于冰箱中保存。 3.7.2 维生素B:标准中间液，浓度为1Opg/mL, 用。.02mo1/L乙酸稀释100mL标准贮备液至1000mL，在甲苯条件下于冰箱中保存。 3.7-3标准工作液，维生素B:的浓度为lpg/mL, 用水稀释10mL标准中间液至100mL。当天配制。 国家技术监借局1997一05一28批准 1998一09一01实施 GB/T5413.12-1997 4 仪器 常用实验室仪器及: 4.1 荧光分光光度计。 5 操作步驻 5.1 抽提 于150mL三角瓶中准确称取5g左右样品，加人盐酸((3.1)60mL，用铝箔纸盖住瓶口，在137.2- 161.7kPa压力下(1251C)消化30min后用氢氧化钠(3.2)调节pH至5.8，再用盐酸(3.1)调节pH至 4.5，将此抽提液移入100mL容量瓶中以燕馏水定容，过滤，吸取25mL滤液于250mL容量瓶中，用蒸 馏水稀释至刻度。 5.2抽提液的氧化 5.2.1 吸取4份样品抽提液((5.1)，每份lOmL，于4个试管中。 5.2.2 于其中二个试管各加1mL标准工作液((3.7.3), 5.2.3 于另外二个试管中各加1mL水。 5.2.4 加1mL冰乙酸((3.3)于每一试管中，混匀。 5.2.5 加高锰酸钾溶液(3.4)0.5mL于每个试管中，混匀。 5.2.6 2min后各加过氧化氢(3.5)0.5mL,混匀，使其褪色。 5.3 荧光测定 依次测定每管荧光强度，激发波长440nm，发射波长565nm, 样液管(未加标准工作液者)经荧光测定后，各加20m