人白血病细胞系(J61,J62和J63)的SCE及其对MMC敏感性的研究.pdfVIP

遗传 HEREDITAS (Beijing) 3(3)- 5-7 1981 人白血病细胞系 J（6-1,J6-2和J6-3）的SCE 及其对MMC敏感性的研究 冯宝章 张云华 （中国医学科学院血液学研究所，四川简阳） 染色体或染色单体断裂可作为研究 DNA 收获后，经0.075MKCl低渗处理 10分钟，常 损伤的一个细胞遗传学指标，但是在正常情况 规空气干燥法制片。标本存放1天之后，用 下染色体和染色单体断裂的出现率并不高，而 1.0M NaH,P04,pH8.0,87-890C中处理 10 姐妹染色单体互换 简（称 SCE）频率则较高，因 分钟左右，Giemsa染色 10分钟左右。染液的 而后者是研究染色体稳定性的一个较好指标。 浓度为 1.2-2.5%，即每毫升磷酸缓冲液 p（H 丝裂霉素 M（MC）是一种强的致突变和 6.8）加入 Giemsa原液1-2滴。 致癌剂[a1，同时又是强的 SCE诱发剂。 为了了解白血病细胞与 SCE的关系，我们 实 验 与 结 果 采用 BrdUrdGiemsa方法C3，对本所近年来先后 一（）3个细胞系 SCE的观察 建立的3个人白血病细胞系 （J6-1)J6-：和J6-3) 先后观察了J6-；细胞系的第41,67,74和 进行了SCE的分析，并用 MMC诱发 SCE, 75代；J6-：细胞系的第52,54和 83代；J6-：细 以便进一步了解白血病细胞对化学致癌剂和诱 胞系的第 1,26,30和31代。每代观察分散良 变剂的敏感性。现将结果报道如下。 好、完整无丢失、且每条染色体之姐妹单体均明 显分染的中期细胞20个以上，计算其互换数， 材 料 与 方 法 求得各系每代细胞的互换率 S（CE／细胞），并 3个细胞系均来源于急性非淋巴细胞型白 以 25例献血员外周血淋巴细胞的正常互换率 血病病人的外周血或骨髓。J6-：细胞系来源于 为对照 （见图版1,1,2)，进行观察比较。观察 一例急性粒单型白血病人的外周血；J6-：来源 时除了计数染色体两臂上的互换外，同时还计 于一例亚急粒和一例粒单型白血病人外周血细 数发生在着丝点位置上的互换，并注意排除由 胞的混合培养；J6-3则来源于一例急粒病孩死 于染色单体的扭曲而造成的假象 （我们认为染 后一小时的骨髓细胞。有关这3个细胞系的建 色体扭曲之后，同一个单体的长臂和短臂染色 立和培养方法已有另文报道t110 应当一致，而且是连续的，不在着丝点位置断 我们所研究的细胞均由本所五室病毒组提 开）。观察结果见表1oJ6-，细胞系SCE频率 供。每代细胞在传代当天加人 BrdUrd，剂量 为 10.6士0.8;J6-：细胞系为 12.9士4.2;J6-；细 为每毫升培养物30微克 相（当于10-`M)o避 胞系为 12.5士2.2SCE／细胞，对照组为 5.5士 光条件下37℃分别培养 48和72小时。细胞 1.8，差异非常显著 P（＜0.01或0.001), 开始培养之后24小时加人MMC，最终浓度为 为了了解 SCE是否有集中于某些 （或某 3毫微克／毫升，再培养48小时，并以正常人外 个）染色体组，乃至某些 （或某个）染色体或染色 周淋巴细胞为对照。培养终止前5-6小时加 FengBaozhangetal.:SisterChromatidExciaanges 人秋水仙素，最终浓度0.018微克／毫升。细胞 inHumanLeukenieCellLines(J.J,_J.-,) 5 裹 1 人白血病细胞系的互换率 J6-